細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

服務(wù)簡介：

     細(xì)胞轉(zhuǎn)染的基本原理將外源DNA克隆到載體上后導(dǎo)入細(xì)胞，借助宿主細(xì)胞表達載體上的目的片段，從而使目的基因在細(xì)胞中發(fā)揮功能。目前轉(zhuǎn)染方法有多種，如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法、磷酸鈣－DNA共沉淀法、電穿孔轉(zhuǎn)染法、腺病毒感染等。
      常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時轉(zhuǎn)染，另一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，前者轉(zhuǎn)染的外源DNA不整合到宿主染色體中，通常表達只持續(xù)幾天，一般在轉(zhuǎn)染24-72小時后檢測。后者轉(zhuǎn)染的外源DNA將整合到宿主染色體中，可持續(xù)性表達，一般可用于穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作為轉(zhuǎn)染試劑，所有實驗步驟及試劑按照廠家建議的用量。實驗中使用轉(zhuǎn)染試劑在常溫條件下同待轉(zhuǎn)染質(zhì)粒/RNA在培養(yǎng)基中組裝成復(fù)合體，按照一定的比例將上述裝配產(chǎn)物加入到對數(shù)生長期的細(xì)胞中。待培養(yǎng)一段時間后，可結(jié)合下游實驗檢測項目。

 服務(wù)流程：

1. 質(zhì)粒：
   a. 進行預(yù)實驗，通過轉(zhuǎn)染含有報告基因的質(zhì)粒優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件；
   b. 轉(zhuǎn)染條件確定后，按照客戶方案進行轉(zhuǎn)染；
   c. qPCR或Western Blot檢測轉(zhuǎn)染效率。
   （2）SiRNA：
   a. 根據(jù)基因序列，設(shè)計并合成siRNA；
   b. 進行預(yù)實驗，通過轉(zhuǎn)染帶有熒光標(biāo)記的陰性對照siRNA優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件；
   c. 通過qPCR和Western Blot驗證siRNA的沉默效率，篩選siRNA*使用濃度。

客戶提供：
待轉(zhuǎn)染細(xì)胞株及細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)信息，待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒信息，目的蛋白一抗；待轉(zhuǎn)染的SiRNA，預(yù)測被調(diào)控基因的蛋白的抗體。
交付內(nèi)容：
瞬時轉(zhuǎn)染的實驗報告單，含實驗原始實驗圖片、實驗方法、siRNA序列等。

收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實驗，病理實驗，免疫學(xué)實驗，細(xì)胞實驗，動物實驗，蛋白組學(xué)實驗等，能夠進行藥效學(xué)評價、毒理學(xué)評價、細(xì)胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)！

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