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外泌體提取
服務簡介:
外泌體是一類幾乎所有類型的細胞都能分泌的大小介于30-150nm的含有RNA和蛋白質等物質的微小囊泡結構,廣泛存在于各種體液中參與調控重要的細胞生理活動。Exosome攜帶蛋白質包括源細胞非特異性和源細胞特異性兩類蛋白分子。前者可能與exosome的生物發生和生物學作用有關,另一類是特殊蛋白質,這類蛋白質只存在于某種特殊的細胞分泌的exosome,而這些特定細胞源的exosome與其生物學功能有著密切。包含的RNA大部分為miRNA,其余為rRNA、lncRNA、DNA和其他RNA。
服務流程:
1、樣品收集處理
2、外泌體提取、質檢
3、RNA抽提、質檢
4、高通量測序
5、標準信息分析
6、高級信息分析
7、表達差異分析和定制化信息分析
服務要求:
1、準備新鮮或凍存的血液上清液置于冰上。如果樣品是凍存的,放置于25-37 ℃水浴鍋直至血液*溶解后,置于冰上。
2、小心將血液上清液,過0.45um濾膜,收集過濾液。
服務流程:
1、吸取0.5ml的血液到一干凈的管子,56℃水浴15分鐘
2、4 ℃ 12000rpm離心5分鐘,取上清至新的離心管
3、向該離心管中分別加入0.05ml的提取液1和0.05ml的提取液2。
4、上下顛倒管子或用移液槍吹打,直至血液上清液和提取液*混勻。
5、在冰上孵育2小時。
6、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。
7、小心,快速吸去上清,加800ul的提取液 3,用移液槍反復吹打管底沉淀。
8、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。
9、小心,快速吸去上清,用30ul 重懸液吹打,溶解管底外泌體沉淀。
10、用于下游的蛋白、核酸、和其他分析。未及時使用時,分裝后-80 ℃保存。
注意事項:
A、本試劑盒不適用于從其他體液或細胞上清中分離外泌體。其他相關體液的外泌體提 取試劑盒是根據不同 生物樣品進行了相應的提取優化,請分別訂購。
B、通常情況下,0.25-0.5ml血液就能提供足夠的外泌體樣品用于常用的下游分析。
C、對于從大體積的血液樣品中(>5ml)分離外泌體,建議按照1ml/份進行相應的分裝,提取以確保充分的外泌體提取效率。
收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務!
外泌體提取/外泌體
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