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mRNA干擾慢病毒構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)原理:
慢病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,名稱源自該種病毒長達(dá)數(shù)年的潛伏期,其中zui為人所知的是人類免疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1直徑約120nm,含兩條正鏈RNA,可有效的進(jìn)入細(xì)胞核中,對分裂期細(xì)胞及非分裂期細(xì)胞均具有很高的感染效率。對以HIV-1為基礎(chǔ)進(jìn)行的慢病毒載體的改造,主要是去除致病基因減少輔助質(zhì)粒與載體質(zhì)粒的同源性,zui終體現(xiàn)在滴度、生物安全性和外源基因表達(dá)效率上的提高,見結(jié)構(gòu)示意圖。
慢病毒包裝系統(tǒng)特點(diǎn):可通過順式作用元件將攜帶的基因運(yùn)送到細(xì)胞核,將要表達(dá)的基因序列整合到細(xì)胞基因組中,后續(xù)可以通過篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株獲得持續(xù)穩(wěn)定的高表達(dá)。
服務(wù)流程:
1、客戶提供背景資料,我們共同探討服務(wù)的可行性和技術(shù)路線。
2. 簽訂技術(shù)服務(wù)合同,商定服務(wù)收費(fèi)、任務(wù)期限等,客戶需要預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%-70%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束,按合同內(nèi)容交付結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. shRNA表達(dá)載體的選用:客戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要選用不同的慢病毒載體。
2. 設(shè)計(jì)RNAi靶序列:
3. shRNA慢病毒載體構(gòu)建:合成模板、雙酶切shRNA空載體、連接與轉(zhuǎn)化、測序鑒定、質(zhì)粒制備及定量。
4. 提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 我們將提供包裝純化好的各靶點(diǎn)的慢病毒顆粒、測序結(jié)果、滴度檢測結(jié)果和病毒構(gòu)建包裝純化實(shí)驗(yàn)報(bào)告等。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等,能夠進(jìn)行藥效學(xué)評價(jià)、毒理學(xué)評價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)!
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