NFS-60  小鼠白血病細胞G-CSF依賴性

操作步驟：

收到細胞后，在倒置鏡下(zui好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換8-10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。

分子生物學

熒光定量PCR|Real-Time PCR|siRNA設計合成|原位雜交|雙熒光素報告基因|RNA提取|定量PCR|多重PCR|質粒構建|基因克隆

細胞生物學

細胞培養(yǎng)|MTT檢測|CCK-8檢測|細胞凋亡檢測|細胞周期檢測|siRNA轉染|細胞侵襲|細胞遷徙|細胞劃痕

免疫病理學

免疫組化|免疫熒光|Tunel凋亡|western blot|Elisa檢測

動物造模

急慢性結腸炎模型|肝纖維化模型|哮喘模型|糖尿病模型|肥胖模型|裸鼠接種腫瘤|非酒精性脂肪肝