目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細胞相關產品>>細胞凋亡檢測試劑盒>> CA1030Annexin V PE/7-AAD 凋亡檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 20T |
---|---|---|---|
貨號 | CA1020 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油 |
主要用途 | 檢測細胞凋亡 |
Annexin V PE/7-AAD 凋亡檢測試劑盒
細胞凋亡是細胞的基本特征之一,在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面都起到 十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡 過程中翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)高親和力特異結合。FITC-Annexin V 結 合到凋亡細胞后,在藍色光的激發下,發出綠色熒光,區分出凋亡細胞與正常細胞。碘化丙啶 (Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和死細胞的 破損細胞膜能夠穿透,并使細胞核紅染。將 FITC-Annexin V 與 PI 匹配使用,可以將凋亡早期的細 胞和晚期的細胞區分開來。
Annexin V PE/7-AAD 凋亡檢測試劑盒
產品簡介:
細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面,這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外,使 PS 暴露在細胞膜外表面。PS 是一種帶負電荷的磷脂,正常主要存在于細胞膜的內面,在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS 暴露在細胞膜外。Annexin V 具有易于結合到磷脂類如 PS 的特性,對 PS 有高度的親和性。因此,該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的 PS。PS 轉移到細胞膜外不是凋亡所*的,也可發生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的,而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就破壞了。因此,可以采用 AnnexinV 與7-AAD 雙染的方法,通過流式檢測細胞早期凋亡。
操作步驟:
標記的 Annexin V 可結合流式細胞儀用于檢測細胞外膜上的磷酯酰絲氨酸
1.用去離子水按 1:4 稀釋結合緩沖液(4ml 結合緩沖液+12ml 去離子水);
2.用 4℃預冷的 PBS 洗細胞兩次,用 250ul 結合緩沖液重新懸浮細胞,調節其濃度為 1× 106/ml;
3.取 100μl 的細胞懸液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V/PE 和 10μl 7AAD 溶液;
4.混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘;
5.在反應管中加 400μl PBS,流式細胞儀(FACS)分析
(注:消化細胞時不能用含 EDTA 的胰酶)
相關文獻:
《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影響因子:3.062 PMID:30076744