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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>基因工程>>PCR>> RP1100Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)
  • Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)
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  • 品牌
  • 型號 RP1100
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 北京市
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更新時間:2024-08-20 10:59:45瀏覽次數:1349評價

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Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)
本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉錄反應以及隨后的PCR擴增。它采用M-MLV進行反轉錄反應,能夠獲得較長的反轉錄產物。同時,在20ul反轉錄體系和50ul PCR反應體系中,還可以一次性得到足夠量的PCR產物用于后續的克隆實驗。本試劑盒中配制的酶均為進口的酶。RT酶采用進口的M-MLV,所以cDNA更長,基因的信息保留得更完整!

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)

操作步驟:

一、反轉錄反應

1、在冰浴的無 RNase 的離心管中加入如下反應成分: 1-5ug 總 RNA 或 50-500ng mRNA 2ul Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特異性引物補 RNase-free ddH2O 14.5ul

2、70℃保溫 5min 后迅速在冰上冷卻 2min,簡短離心收集反應液后加入以下各組分: 4ul 5×M-MLV Buffer 1ul dNTPs 0.5ul RNasin 1ul M-MLV

3、42℃溫浴 60min,如果是用隨機引物,請先將離心管置 25℃溫浴 10min,再 42℃溫浴 60min。

4、95℃加熱 5min 終止反應,置冰上進行后續實驗或-20℃保存。

5、用 RNase-free ddH2O 將反應體系稀釋到 50ul,取 2-5ul 進行 PCR 反應。

二、PCR 反應

1、按以下各組分配制 50ul PCR 反應體系: 10×PCR Buffer 5ul dNTPs 1ul 上游引物(用戶自備 10um) 1ul 下游引物(用戶自備 10um) 1ul RT 反應產物 2ul Taq Polymerase 0.5ul ddH2O x ul Total Volume 50ul

2、混勻后短暫離心,PCR 儀擴增,瓊脂糖凝膠電泳觀察結果。

注意事項:

1、 用于 cDNA 合成反應的相關試劑和耗材盡可能用 DEPC 進行處理,并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時,先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后,再將溶液進行過濾除菌處理。

2、 試劑盒的各組分應在-20℃保存,避免反復凍融,有效期 12 個月。

3、 RNA 樣品要避免反復多次凍融,應使 RNA 在冰浴中處于融化狀態。

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)

產品簡介:本試劑盒適用于各種 RNA 制品的反轉錄反應以及隨后的 PCR 擴增。它采用 M-MLV 進行反轉錄反應,能夠獲得較長的反轉錄產物。同時,在 20ul 反轉錄體系和 50ul PCR 反應體系中,還可以一次性得到足夠量的 PCR 產物用于后續的克隆實驗。本試劑盒中配置的酶均為進口的酶。RT 酶采用進口的 M-MLV,所以 cDNA 更長,基因的信息保留得更完整!反轉錄過程中特異的 RNase 抑制劑可有效降低由于外源 RNase 污染而導致實驗失敗的風險。本試劑盒使用方便、快捷,可廣泛用于 cDNA 克隆及目的基因檢測等分子生物學實驗。

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