目錄:北京索萊寶科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)>>細(xì)胞培養(yǎng)試劑>> P9230TBD 大鼠外周血單核細(xì)胞分離液試劑盒
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更新時(shí)間:2024-08-22 13:42:29瀏覽次數(shù):1688評(píng)價(jià)
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A. 本分離液是敏光型的,在運(yùn)輸和貯藏過(guò)程中應(yīng)在 18℃-25℃避光保存,啟封后置 4
℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,
影響分離效果。
B. 待分離的血液、組織及細(xì)胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一
定在20℃水浴箱中復(fù)溫20分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時(shí)分離效果,
且所有操作過(guò)程一定要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。
C. 由于各品牌離心機(jī)的性能不同,國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響
分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,摸索佳的分離條件(具體分離條件
各實(shí)驗(yàn)室自定)。
D. 使用無(wú)靜電反應(yīng)的離心管,推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管。
E. 優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中應(yīng)去除抗凝劑
體積。
F. 分離過(guò)程中所用其他試劑如:羥乙已基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細(xì)胞洗滌液及紅細(xì)
胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為優(yōu)選擇,本公司相關(guān)系列產(chǎn)品無(wú)菌、無(wú)病毒、無(wú)支原體、低內(nèi)
毒素水平且無(wú)細(xì)胞毒性,所獲得的細(xì)胞可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài)。
4. 應(yīng). 用
適用于從動(dòng)物血液或臟器組織中分離單核細(xì)胞。
5.. . . 產(chǎn)品性能指標(biāo)
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5...EU/ml
無(wú)菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下,,,
含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下
6.
7. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 7. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
A. 試劑
單核細(xì)胞分離液試劑盒所含試劑、組織勻漿液、羥乙已基淀粉 550、胎牛血清
B. 器材
玻璃離心管、玻璃滴管
水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)、無(wú)菌工作臺(tái)
8. 各種動(dòng)物 8. 各種動(dòng)物單核細(xì)胞分離液試劑盒使用方法說(shuō)明及圖例
A. 在 10ml 或 15ml 玻璃離心管中依次小心加入 A、D 兩種液體各 2ml,制成梯度界面(各液面分層一定要清晰);
B. 取 1ml新鮮抗凝血按1:1比例與全血及組織稀釋液混勻并小心疊加于D液之液面上;或?qū)⒔M織單細(xì)胞懸液(細(xì)胞濃度為2×108
-1×109個(gè)/ml,制備方法詳見“10.組織單細(xì)胞懸液的制備方法”)疊加于D液之液面上;
C. 以400g(約1500轉(zhuǎn)/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子);
此時(shí)離心管中由上下細(xì)胞分為六層。*層;為血漿(稀釋液)層。第二層;;;為;單核
細(xì)胞層。。。第三層;為透明 D 液層。第四層;為淋巴細(xì)胞層。第五層;為透明 A 液層。第六層;
為極少量紅細(xì)胞層。收集第二層單核細(xì)胞放入含 4-5ml 細(xì)胞洗滌液的試管中,充分混勻后,
以 500g(約 1800 轉(zhuǎn)/分)離心 20 分鐘,棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌 2 次即得所需單核細(xì)胞。
注::A. 提取率約為 80%。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)