目錄:北京索萊寶科技有限公司>>核酸相關(guān)>>DNA Marker>> M1070M1070 D2000 plus DNA Ladder
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | M1070 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | D2000 plus DNA Ladder是由單獨(dú)制備的PCR產(chǎn)物混合而成,共有 |
M1070 D2000 plus DNA Ladder
儲存條件 | -20℃,有效期1年 |
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外觀(性狀) | 液體 |
單位 | 支 |
M1070 D2000 plus DNA Ladder是由單獨(dú)制備的PCR產(chǎn)物混合而成,共有9條DNA段,已加入上樣緩沖液,可以直接電泳,每次上樣5μl。為便于電泳后觀察,特異性加強(qiáng)750bp條帶,其濃度約為100ng/5μl,其它條帶的DNA濃度約為50ng/5μl。
參考片段(bp):100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000
質(zhì)粒是細(xì)胞內(nèi)的一種環(huán)狀的小分子DNA,是DNA重組的常用載體,在DNA重組中,質(zhì)粒或經(jīng)過改造后的質(zhì)粒載體可通過連接外源基因構(gòu)成重組體。在質(zhì)粒提取過程中,多數(shù)質(zhì)粒粗提取物中含有三種構(gòu)型的質(zhì)粒:共價(jià)閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)、質(zhì)粒的兩條鏈沒有斷裂、超螺旋開環(huán)DNA(ocDNA)、質(zhì)粒的一條鏈斷裂、松弛的環(huán)狀分子線形DNA(lDNA):質(zhì)粒的兩條鏈均斷裂;線性分子質(zhì)粒DNA的分子構(gòu)型。
質(zhì)粒小量提取的方法
1.將3~5ml菌液13,000rpm離心30秒收集沉淀(菌體)。 如果用1.5ml或2ml離心管則需反復(fù)離心2~3次。
2.倒掉上清,將沉淀(菌體)*懸浮于100μl懸 浮液(溶液I)中。上清要盡可能去除干凈,可用濾紙吸干。沉淀要 用混旋器*懸浮,否則將直接導(dǎo)致下一步的裂 解不*,進(jìn)而影響質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和純度。
3.加入150μl裂解液(溶液II),輕柔地顛倒混勻10 次左右,溶液逐漸變得粘稠、清亮。不可用混旋器劇烈振蕩,否則會(huì)使質(zhì)粒DNA斷裂; 裂解時(shí)間不宜超過5分鐘,否則會(huì)造成染色體DNA 的污染及質(zhì)粒DNA的產(chǎn)率降低。
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