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鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測
鈣熒光探針 Fluo 3-AM 細胞檢測產品說明
Ø Fluo-3 AM 是常用的檢測細胞內鈣離子濃度的熒光探針之一。分子式為 C51H 50Cl 2N 2O 23,分子量為
1129.85。
Ø Fluo-3 和 Fura-2 相比,其優點是:一方面可以被氬離子激光(argon-ion laser) 的 488nm 激發光激發,便于檢測;另一方面,Fluo-3 和鈣離子結合后熒光變化更強,即對鈣離子濃度變化的檢測更加靈敏;同時,Fluo-3 和鈣離子的結合能力較弱,這樣可以比 Fura-2 檢測到細胞內更高濃度的鈣離子水平;此外,對于細胞內的鈣離子的即時變化反應得更加準確,減小了因為和鈣離子解離速度慢而導致的熒光變化滯后。
Ø 本 Fluo-3 AM (鈣離子熒光探針) 是配制于無水DMSO (anhydrous DMSO)中的儲存液,濃度為 5mM。
Ø Fluo-3 AM 是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM 的熒光非常弱,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。
Fluo-3 AM 進入細胞后可以被細胞內的酯酶剪切形成 Fluo-3,從而被滯留在細胞內。Fluo-3 可以和鈣離子結合,結合鈣離子后可以產生較強的熒光,大激發波長為 506nm,大發射波長為 526nm。實際檢測時推薦使用的激發波長為 488nm 左右,發射波長為 525-530nm。
用于細胞內鈣離子檢測時,Fluo-3 AM 的常用濃度為 0.5-5μM 。通常用含有 0.5-5μM 的 Fluo-3 AM 的適當溶液和細胞一起在 20-37℃孵育 15-60 分鐘進行熒光探針裝載,隨后適當洗滌,洗滌后可以考慮適當再孵育20-30 分鐘以確保Fluo-3 AM 在細胞內*轉變成 Fluo-3。
Ø 本 Fluo-3 AM 在 4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內,可以 20-25℃水浴溫育片刻全部融解后使用。
Ø 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作