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用于細胞凋亡檢測的Hoechst 33258染色液(即用型)
貨號:C0020
規格:10ml/50ml
保存:-20℃避光保存,一年有效。
產品簡介:
Hoechst 33258,也稱 bisBenzimide H 33258 或 HOE 33258,是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst 33258 染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33258 也常用于普通的細胞核染色,或常規的 DNA 染色。Hoechst 33258 的大激發波長為 346nm,大發射波長為 460nm; Hoechst 33258 和雙鏈 DNA 結合后, 大激發波長為 352nm, 大發射波長為 461nm。 本 Hoechst33258 染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。
使用說明:
1. 對于固定的細胞或組織:
a. 對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續步驟進行 Hoechst 33258 染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續的Hoechst 33258 染色。
b. 對于貼壁細胞或組織切片,加入少量 Hoechst 33258 染色液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,混勻。室溫放置 3-5 分鐘。
c. 吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對于活細胞或組織:
a. 加入適當量 Hoechst 33258 染色液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入 1ml染色液,對于 96 孔板一個孔需加入 100 微升染色液。
b. 在適宜于細胞培養的溫度下培養 20-30 分鐘。棄染色液,用 PBS 或培養液洗滌 2-3 次即可進行熒光檢測。
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