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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>信號系列>> 脫氫酶(DHA)生化檢測試劑盒

脫氫酶(DHA)生化檢測試劑盒
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參考價300-5000/盒
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥300 ~ ¥5000

具體成交價以合同協議為準
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更新時間:2024-11-22 12:22:57瀏覽次數:733評價

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供貨周期 現貨 規格 100管/96樣 50管/48樣
貨號 EY-01S1357 應用領域 生物產業
主要用途 僅用于科研
脫氫酶(DHA)生化檢測試劑盒脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。

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產品名稱

規格

貨號

脫氫酶(DHA)生化檢測試劑盒

100/96 50/48   

EY-01S1357

 

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測定意義

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。

測定原理

在細胞呼吸過程中,氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現紅色,于485nm測定其吸光值,即得脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品

天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96孔板、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。





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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。


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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應時間,1min。

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