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參考價(jià) | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000
更新時(shí)間:2024-12-08 09:11:21瀏覽次數(shù):235評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號(hào) | EY-XY4218 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Porcine Aortic Endothelial Cells |
種屬來(lái)源 | 豬 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長(zhǎng)。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來(lái)源組織或細(xì)胞的特性, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng)、結(jié)構(gòu)、代謝、有無(wú)毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),因?yàn)榉椒ê?jiǎn)單,細(xì)胞也較容易生長(zhǎng)。尤其是培養(yǎng)心肌,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長(zhǎng)出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進(jìn)行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺(tái)/無(wú)菌間、無(wú)菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無(wú)菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺(tái)中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無(wú)特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長(zhǎng)出,形成生長(zhǎng)暈。
(9) 一般說(shuō)來(lái),若培養(yǎng)液無(wú)明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 主動(dòng)脈 |
種屬 | 豬 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
形態(tài)特征 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Porcine Aortic Endothelial Cells |
貨號(hào) | EY-XY4218 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(aortic endothelial cells)組成了主動(dòng)脈內(nèi)壁,并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下,分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長(zhǎng)。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來(lái)控制和精確調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞可有效地幫助研究者研究?jī)?nèi)皮功能失調(diào)的機(jī)理,動(dòng)脈粥樣化等疾病的發(fā)病機(jī)理以及發(fā)展新的治療方法。 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒 ,英文名: SELE ELISA Kit
人肌酸激酶(CK)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCreatineKinase,CKELISAKit 96T/48T
大鼠合成酶(GLUL)免疫試劑盒 Rat Glamine syhetase,GLUL ELISA kit
CLIAKitforVIP(MouseVasoactiveIestinalPeptide)ELISAKit小鼠血管活性腸肽規(guī)格:48T/96T
毛發(fā)砷元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKiVAg人輪狀病毒抗原規(guī)格:48T/96T
小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒
Humandopaminedecarboxylase,DDCELISAKit 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CDK2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠血管緊張素Ⅱ 英文名稱: Angiotensin Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANGⅡ
小鼠血管生成素-2 英文名稱: Angiopoietin-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANG 2
小鼠心素 英文名稱: aialnaiureticpeptide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ANP
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子 英文名稱: apoptosis-inducing factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AIF
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè);3、50ml離心筒2個(gè)4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺(tái);
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動(dòng)物(倉(cāng)鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無(wú)菌培養(yǎng)皿中,用新的無(wú)菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無(wú)菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無(wú)菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無(wú)菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng)。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無(wú)菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來(lái)的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無(wú)菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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