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細(xì)胞分布不均及解決辦法
閱讀：1975 發(fā)布時(shí)間：2017-7-7
問：我的細(xì)胞接種培養(yǎng)板，細(xì)胞總是聚集在周邊部分，該如何處理啊？我看園子里有的戰(zhàn)友的細(xì)胞卻是聚集在中間，是不是板子的質(zhì)量題目啊？
答：請(qǐng)問你的細(xì)胞是如何混勻的？是滴管奏樂還是振蕩培養(yǎng)板？假如是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細(xì)胞甩到周邊部分，導(dǎo)致細(xì)胞中間少，四周多！自己可是試試！
周邊一般是相對(duì)會(huì)多一點(diǎn)，但是中間的數(shù)目也不會(huì)很少啊~~ 展板的時(shí)候我也沒有特異往振蕩培養(yǎng)板。
大概是板子的質(zhì)量題目吧或者是不是展板時(shí)候的細(xì)胞密度太低了？我用的corning的板 。
一個(gè)好辦法：在你培養(yǎng)種板之前，把培養(yǎng)板放進(jìn)培養(yǎng)箱里進(jìn)行幾個(gè)小時(shí)的飽和后再取出，種進(jìn)細(xì)胞時(shí)氣力要輕，可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加進(jìn)讓細(xì)胞懸液流進(jìn)板孔中，培養(yǎng)的細(xì)胞基本是均勻生長(zhǎng)。記住千萬不要用振蕩器振蕩，否則你的細(xì)胞就會(huì)想你說得那樣聚積在一起。
我今天把培養(yǎng)板放進(jìn)培養(yǎng)箱里幾個(gè)小時(shí)，適當(dāng)?shù)陌鸭?xì)胞密度加大了一下，另外多加了一點(diǎn)培養(yǎng)液，今晚看細(xì)胞展的挺好的。我以為有兩種可能解決你題目的辦法:1.加進(jìn)前奏樂均勻;2.從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加進(jìn)。
問：我在做原代培養(yǎng)時(shí)也碰到過這種情況，我一直以為培養(yǎng)皿展膠不均勻會(huì)導(dǎo)致這種現(xiàn)象，由于混勻的血管段加進(jìn)到培養(yǎng)皿中時(shí)，在相差顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中，24h后貼壁的血管段就是周邊多，中間相對(duì)少些。下次我要試試hkqu戰(zhàn)友的方法看能否改變這種現(xiàn)象。
答：這種現(xiàn)象很正常呀，不知你仔細(xì)觀察過沒有，孔直徑愈小，這個(gè)現(xiàn)象越明顯，我試過，24、96孔板這種現(xiàn)象不可避免，由于液體的附壁使得孔內(nèi)培養(yǎng)液不是成一個(gè)液平面，而是周邊高，就像凹鏡一樣，而使用這兩種孔板由于需要加干預(yù)等原因而不能加足量培養(yǎng)液，使得細(xì)胞隨培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象，假如為了使孔中心也有均勻細(xì)胞而增加接種細(xì)胞數(shù)目的話，這要看你需要觀察何種指標(biāo)，假如是MTT ，免疫組化的話會(huì)由于細(xì)胞成層而影響結(jié)果。
答：請(qǐng)問你的細(xì)胞是如何混勻的？是滴管奏樂還是振蕩培養(yǎng)板？假如是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細(xì)胞甩到周邊部分，導(dǎo)致細(xì)胞中間少，四周多！自己可是試試！
周邊一般是相對(duì)會(huì)多一點(diǎn)，但是中間的數(shù)目也不會(huì)很少啊~~ 展板的時(shí)候我也沒有特異往振蕩培養(yǎng)板。
大概是板子的質(zhì)量題目吧或者是不是展板時(shí)候的細(xì)胞密度太低了？我用的corning的板 。
一個(gè)好辦法：在你培養(yǎng)種板之前，把培養(yǎng)板放進(jìn)培養(yǎng)箱里進(jìn)行幾個(gè)小時(shí)的飽和后再取出，種進(jìn)細(xì)胞時(shí)氣力要輕，可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加進(jìn)讓細(xì)胞懸液流進(jìn)板孔中，培養(yǎng)的細(xì)胞基本是均勻生長(zhǎng)。記住千萬不要用振蕩器振蕩，否則你的細(xì)胞就會(huì)想你說得那樣聚積在一起。
我今天把培養(yǎng)板放進(jìn)培養(yǎng)箱里幾個(gè)小時(shí)，適當(dāng)?shù)陌鸭?xì)胞密度加大了一下，另外多加了一點(diǎn)培養(yǎng)液，今晚看細(xì)胞展的挺好的。我以為有兩種可能解決你題目的辦法:1.加進(jìn)前奏樂均勻;2.從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加進(jìn)。
問：我在做原代培養(yǎng)時(shí)也碰到過這種情況，我一直以為培養(yǎng)皿展膠不均勻會(huì)導(dǎo)致這種現(xiàn)象，由于混勻的血管段加進(jìn)到培養(yǎng)皿中時(shí)，在相差顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中，24h后貼壁的血管段就是周邊多，中間相對(duì)少些。下次我要試試hkqu戰(zhàn)友的方法看能否改變這種現(xiàn)象。
答：這種現(xiàn)象很正常呀，不知你仔細(xì)觀察過沒有，孔直徑愈小，這個(gè)現(xiàn)象越明顯，我試過，24、96孔板這種現(xiàn)象不可避免，由于液體的附壁使得孔內(nèi)培養(yǎng)液不是成一個(gè)液平面，而是周邊高，就像凹鏡一樣，而使用這兩種孔板由于需要加干預(yù)等原因而不能加足量培養(yǎng)液，使得細(xì)胞隨培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象，假如為了使孔中心也有均勻細(xì)胞而增加接種細(xì)胞數(shù)目的話，這要看你需要觀察何種指標(biāo)，假如是MTT ，免疫組化的話會(huì)由于細(xì)胞成層而影響結(jié)果。