Tet on/off鼠糧簡單介紹
閱讀:1584 發布時間:2018-10-13
基于四環素誘導的小鼠基因表達系統(Tet-based)已經廣泛地應用于實驗研究中。此系統利用多西霉素(Doxycycline,四環素類似物,也稱強力霉素)可逆地對目的蛋白表達進行自由地開和關,非常方便地在小鼠任何發育階段觀察小鼠的表型變化;而且對于基因的可控開關還有效避免了持續表達基因引起的轉基因小鼠傳代后的基因沉默。
目前由于多西霉素鼠糧Tet on/off鼠糧需從國外進口,價格高周期長,很多研究人員采用水中添加進口多西霉素的方式誘導。但是多西霉素在水中不穩定且需避光,需頻繁更換水,耗費大量人力物力,誘導效果不理想,結果不穩定;而且由于多西霉素有苦味,需在水中添加高濃度糖分,可能影響小鼠表型的評估。
我們采用高質量的多西霉素,系統比較了不同誘導濃度的效果,采用特殊的飼料加工工藝保證多西霉素活力,zui后在Tet-based的組織特異性雙轉基因小鼠中測試飼料,研發出誘導基因表達的新一代多西霉素鼠糧。除了在轉基因小鼠中使用,該鼠糧還可以誘導移植到小鼠上的導入相關DNA元件的細胞的蛋白表達。
鼠糧為高精飼料配方,用鈷60照射殺菌。未見添加的多西霉素影響小鼠的生長發育和繁殖。