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上海橋星貿(mào)易有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口透析袋,密理博ECL發(fā)光液,B27無(wú)血清培養(yǎng)基,Gibco膠原酶

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公司信息

聯(lián)人:
蔣經(jīng)理
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021-65672052
機(jī):
18221794820
真:
86-021-62097628
址:
上海市楊浦區(qū)寧國(guó)路229號(hào)13號(hào)樓704室
編:
200090
個(gè)化:
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www.qx5147.com
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http://www.24590.cn/st321209/
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動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒
動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒
參考價(jià) 360
訂貨量 1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

更新時(shí)間:2024-01-07 20:14:59瀏覽次數(shù):1497

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【簡(jiǎn)單介紹】
貨  號(hào):D0022
名  稱:動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒
規(guī)  格:50T/200T
價(jià)  格:360.00/1180.00
【詳細(xì)說(shuō)明】

動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒

 

試劑盒組成

50T

200T

保存溫度

RNaseA(10mg/ml)

500ul

2ml

-20℃

蛋白酶K(10mg/ml)

500ul

2ml

-20℃

裂解液

12.5ml

50ml

RT

結(jié)合液

25ml

100ml

RT

玻璃奶

2.5

10ml

RT

TE緩沖液

10ml

30ml

RT

 

原理簡(jiǎn)介
本試劑盒適用于動(dòng)物組織及培養(yǎng)的細(xì)胞樣本,用于從中提取基因組DNA。對(duì)于尾,骨等可用,但提取效果一般。*的裂解緩沖液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物質(zhì),并利用玻璃奶吸附DNA,進(jìn)一步的去掉其他雜質(zhì),提取出來(lái),得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)
1.裂解液低溫時(shí)可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在熱水中溫浴幾分鐘幫助重新溶解,恢復(fù)澄清透明后冷卻到室溫即可使用。
2.避免試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
3.RNaseA經(jīng)常使用可放2-8度保存,蛋白酶K請(qǐng)放-20度保存。
4.同一樣本,如果想大量提取,可以增加樣本量,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會(huì)成倍減少。

操作步驟
1.取不超過(guò)108個(gè)細(xì)胞),12,000rpm,離心30秒,盡可能的吸凈上清。如果是組織,可用液氮研磨或者盡可能的剪碎,取不超過(guò)20mg,放入離心管中。
2.加入250ul裂解液,立即震蕩混勻,可選做步驟:如需要去除RNA,可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振蕩混勻,室溫放置5-10分鐘。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液,顛倒混勻,65℃放置10-30分鐘,期間顛倒3-5次,小心內(nèi)心管蓋受熱開啟。如30分鐘沉淀無(wú)法*消失,請(qǐng)注意第6步處理。
4,在上清中加入三倍體積無(wú)水乙醇,充分混勻。
5.12000rpm離心5分鐘,吸去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul結(jié)合液,65℃水浴1-2分鐘,核酸沉淀可溶解(如無(wú)法*溶解,可轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中,棄沉淀)。
6.玻璃奶搖勻。加入50ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,70%乙醇重復(fù)洗一次,再用無(wú)水乙醇洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘(如果玻璃奶加量,請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)放置時(shí)間,此步為去除殘余酒精,以免影響下游實(shí)驗(yàn)),加入50-100ul TE緩沖液混勻溶解,65℃水浴5分鐘。離心,取上清為所提基因組。
8.電泳或者其他方法檢測(cè),進(jìn)入下游實(shí)驗(yàn)。



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