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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書
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訪問次數(shù)：1267更新時(shí)間：2024-08-25 12:28:21
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 一周 |
|---|
該細(xì)胞轉(zhuǎn)染了NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，表達(dá)多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白（LDL）證實(shí)了該細(xì)胞株的內(nèi)皮細(xì)胞特性。細(xì)胞因子和脂多糖（LPS）可誘導(dǎo)細(xì)胞分泌MAdCAM-1和E選擇素。TNF-α、IL-1和LPS的誘導(dǎo)是時(shí)間和濃度依賴。早代數(shù)的未刺激細(xì)胞會分泌MAdCAM-1和VCAM-1，但找過30代不分泌。細(xì)胞會組成
產(chǎn)品介紹
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書
| 該細(xì)胞轉(zhuǎn)染了NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，表達(dá)多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白（LDL）證實(shí)了該細(xì)胞株的內(nèi)皮細(xì)胞特性。細(xì)胞因子和脂多糖（LPS）可誘導(dǎo)細(xì)胞分泌MAdCAM-1和E選擇素。TNF-α、IL-1和LPS的誘導(dǎo)是時(shí)間和濃度依賴。早代數(shù)的未刺激細(xì)胞會分泌MAdCAM-1和VCAM-1，但找過30代不分泌。細(xì)胞會組成型分泌ICAM-1，并且表達(dá)量會在LPS、IL-1和TNF-α刺激下增多。P選擇素在早代數(shù)和晚代數(shù)細(xì)胞中受TNF-α誘導(dǎo)分泌，但30代后分泌量增加。 |
產(chǎn)品介紹
生長特性 貼壁
形態(tài) 梭形
培養(yǎng)基 90% RPMI-1640+10%FBS
生長條件 95%空氣+5% 二氧化碳 37攝氏度
凍存條件 90％FBS ＋10％DMSO
污染檢測 支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測結(jié)果為陰性
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式：
（1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇；
（2）存活細(xì)胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)步驟
收到常溫細(xì)胞后處理方法
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
２. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)２－４小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)．
３. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，貼壁特性(貼壁/懸浮），細(xì)胞形態(tài)，所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基．血清比例，所需細(xì)胞因子，傳代比例，換液頻率等．
４. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照，記錄細(xì)胞生長狀態(tài)．
５. 貼壁細(xì)：若細(xì)胞生長密度超過８０％，可正常傳代，若未超過８０％，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留５ＭＬ左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)８０％左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松．
６. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至５０ＭＬ無菌離心管內(nèi)，１２００rpm離心５min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入５ml培養(yǎng)基吹打．重懸．鏡檢時(shí)，基細(xì)胞密度超過８０％，可將細(xì)胞懸液分至２個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至５ml;若細(xì)胞密度未超過８０％，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)８０％左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作．
方 式： 詳詢經(jīng)理
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Bend.3科研說明書
內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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