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小鼠胰島β細胞Min6科研說明書
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訪問次數(shù):1303更新時間:2024-08-25 12:30:31

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 一周
小鼠胰島β細胞Min6科研說明書
<1>細胞培養(yǎng)
①細胞請于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),大部分細胞是37℃,5% CO2,濕度100%環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細胞培養(yǎng)條件不*,請仔細閱讀相應的細胞說明書,使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。
②細胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng),加入適量說明書上標注的細胞相應*培養(yǎng)基(一般液面高度2-3mm即可)。

<2>細胞傳代(以下步驟適用于10cm皿)
①細胞培養(yǎng)至密度達80%以上
產(chǎn)品介紹

小鼠胰島β細胞Min6科研說明書

細胞傳代(以下步驟適用于10cm皿)
①細胞培養(yǎng)至密度達80%以上時即可傳代,先將細胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好,其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄;
②培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS,輕輕晃動皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍棄;
③加入1mL胰酶,輕輕晃動皿,使胰酶浸沒到皿底所有部位,將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化;
④3min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞不再貼壁,即可加入*步收集的培養(yǎng)基混勻;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止;
⑤將細胞懸液均勻分成幾份,分別加入不同培養(yǎng)皿中,補加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
 

 

產(chǎn)品介紹

生長特性 貼壁

形態(tài) 梭形

培養(yǎng)基 90% RPMI-1640+10%FBS

生長條件 95%空氣+5% 二氧化碳   37攝氏度

凍存條件 90%FBS +10%DMSO

污染檢測 支原體、細菌、酵母和真菌檢測結(jié)果為陰性

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

細胞培養(yǎng)詳細步驟

收到常溫細胞后處理方法

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài).

3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,貼壁特性(貼壁/懸浮),細胞形態(tài),所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基.血清比例,所需細胞因子,傳代比例,換液頻率等.

4. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,記錄細胞生長狀態(tài).

5. 貼壁細:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代,若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ML左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松.

6. 懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ML無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打.重懸.鏡檢時,基細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作.

方     式: 詳詢經(jīng)理

小鼠胰島β細胞Min6科研說明書

 

 內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的*培養(yǎng)基。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通交流。
培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學研究提供實驗細胞技術(shù)服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡zui大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。

 

 
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
 
 



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