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高效液相色譜柱需要怎么清洗?
高效液相色譜柱分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到*分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
高效液相色譜柱需要怎么清洗?
一般反相色譜,經常會用到緩沖鹽。而百鹽對于色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱里面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。*是每次都沖掉。
如果你的柱子流動相里面沒有鹽,那就沒必要沖洗了。
沖洗方法:反相柱子*保存度在純甲醇或者純乙腈里面,但是鹽不溶于純有機相。所以中間過渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么,要看你的流動相。
比如,我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈(70:30)的流動相,那么沖洗的時候*選用10%-15%乙腈水,沖洗1.0ml/min,至少30min,*40min。
如果第二天接著使用的話可以不*純甲回醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用,*用純的有機相封上柱子,同樣是1.0ml/min流速沖洗30min。
另,也不是說不清洗就會壞。我們研發有的時候為了趕項目,來不及沖洗色譜柱。柱子不會怎么樣。就是壽命會短一點而已。