色譜柱的安裝:
1.首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線,同時控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝色譜柱之前,確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。
2.為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)*佳的連接效果,應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
3.使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過100℃。
保存色譜柱:
1.短期保存色譜柱
反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng):
使用緩沖液(酸/堿)或含緩沖鹽的流動相,實驗完成后應(yīng)用20-30柱體積的甲醇或乙腈和水的10:90混合物進(jìn)行沖洗除鹽,再保存在較高比例有機(jī)相或純有機(jī)相中。如需過夜沖洗,可將流速保持在低流速下沖洗,如0.2ml/min流速。針對沖洗的目的,除無機(jī)鹽用高比例水相,除強保留物質(zhì)用高比例水相或者異丙醇。這里需要注意的是,一般針對反相柱子的過夜沖洗是為了清洗強保留物質(zhì),也就是高比例有機(jī)相使用的更多。需要特別注意的是在使用異丙醇的時候需要注意柱壓,盡量降低流速。另外還有一個注意的是不要用純水沖洗普通反相柱子,即便是AQ柱,在沖洗的時候應(yīng)該在水中加入10%的有機(jī)相,防止將填料沖塌陷,影響色譜柱壽命。
其他色譜柱的短期放置,同樣應(yīng)先用和柱子匹配的中性溶劑沖洗好色譜柱,再把色譜柱的兩頭用密封堵頭密封好即可,防止填料干涸。
2.長期保存色譜柱
如色譜柱暫時不用,需要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷或者Hex:IPA=90:10中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。特殊類型色譜柱的儲存,需參考色譜柱說明書,使用廠商推薦的溶劑。
這里特別提一下氨基柱,由于氨基色譜柱的特殊性,如果條件允許,在存放一段時間后,取出再沖洗過渡一下,可以幫助延長柱壽命。