PVDF膜（聚偏氟乙烯膜）在Western Blot實驗中廣泛應用于蛋白質轉印，但其本質是一種具有疏水性的聚合物，需要在使用前進行預處理活化，使其在水性緩沖液中更易使用。PVDF膜具有不同的孔徑大小，這些不同之處會影響其在過濾和分離應用中的性能和適用性。
PVDF孔徑大小不同
• 0.22μm的PVDF膜適用于截留較小的分子，如小于20kD的蛋白質分子。這種膜的孔徑較小，能夠有效地過濾掉較小的顆粒物和細菌。
• 0.45μm的PVDF膜則適用于較大分子的蛋白和核酸，以及大于20kD的蛋白質。這種膜的孔徑較大，更適合于需要保留較大顆粒的場合。
PVDF操作壓力與通量不同
• 0.22μm的膜孔徑較小，通常需要更高的操作壓力來維持相同的通量，這可能導致較高的操作阻力。
• 0.45μm的膜孔徑較大，允許更大的通量，通常需要較低的操作壓力，因此具有較低的操作阻力。
PVDF蛋白質轉移與分辨率不同
• 0.22μm的膜因其較小的孔徑和較高的結合能力，特別適用于分子量小于20kDa的蛋白質轉移。擁有更高轉移的分辨率，適用于檢測蛋白質大小相近的多個條帶或進行精細的蛋白質定量分析。
• 0.45μm的膜則更適合分子量大于20kDa的蛋白質轉移。較大的孔徑減少了膜上的堵塞，分辨率相對較低，但在轉移大分子量蛋白質時可能更為有效。
PVDF應用范圍不同
• 0.22μm PVDF膜適用于高度微生物阻隔的應用，如醫療行業、生物制藥、實驗室和飲用水處理等。
• 0.45μm PVDF膜適用于顆粒去除、預過濾和一些微生物過濾應用，如食品和飲料加工、廢水處理以及實驗室預過濾等。
PVDF膜使用注意事項
? 甲醇激活
使用前用甲醇浸泡。甲醇能夠使PVDF膜的表面活化，增加膜的疏水性，從而提高其對蛋白質的結合能力。
? 避免干燥
激活膜后、轉膜過程中以及轉膜結束后，都要快速在液體間轉移膜，避免膜在空氣中干燥，影響后續曝光。
? 避免直接接觸
應避免直接用手接觸膜表面，以防止油脂和蛋白質污染，影響轉膜效率并產生背景污斑。全程應使用鑷子操作膜，以減少污染和物理損傷。
? 排盡氣泡
在進行電轉印時，需要確保凝膠和PVDF膜之間沒有氣泡，因為氣泡會影響蛋白質的均勻轉移。
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