在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域,培養(yǎng)基的選擇對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化至關(guān)重要。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)和DMEM/F12是兩種常用的培養(yǎng)基,它們?cè)诔煞帧⒂猛疽约斑m用的細(xì)胞類型上存在一定的差異。
DMEM培養(yǎng)基
DMEM培養(yǎng)基是在經(jīng)典的MEM(最小必需培養(yǎng)基)基礎(chǔ)上改良而成,由Eagle于1959年開發(fā),后來(lái)由Dulbecco進(jìn)行了改進(jìn)。與MEM相比,DMEM增加了2倍的氨基酸和4倍的維生素含量,還加入了非必須氨基酸、微量鐵離子和丙酮酸鈉。這些改進(jìn)使得DMEM成為支持多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)與繁殖的理想選擇。
根據(jù)葡萄糖含量的不同,DMEM可分為低糖型(1000 mg/L葡萄糖)和高糖型(4500 mg/L葡萄糖)。低糖型培養(yǎng)基更適合代謝速度較慢且依賴貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,如原代細(xì)胞和某些癌細(xì)胞。高糖型培養(yǎng)基則由于其提供更多的能量,更適合于生長(zhǎng)速度快、粘附性低的細(xì)胞類型,如雜交瘤骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞。此外,還有不含葡萄糖的DMEM,這種培養(yǎng)基可以根據(jù)具體研究需求自行調(diào)節(jié)葡萄糖濃度,提供了更大的實(shí)驗(yàn)靈活性。
DMEM因其成分的優(yōu)化設(shè)計(jì),廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域。例如,在疫苗生產(chǎn)中,DMEM被用于CHO細(xì)胞表達(dá)EPO(促紅細(xì)胞生成素)和乙型肝炎疫苗的生產(chǎn)中。其高糖型培養(yǎng)基常用于生長(zhǎng)快的單一細(xì)胞培養(yǎng)和病毒宿主細(xì)胞的培養(yǎng),而低糖型則更適合代謝作用較慢的細(xì)胞培養(yǎng)。
DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM/F12培養(yǎng)基是通過將DMEM和Ham's F-12 Nutrient Mixture以1:1的比例混合得到的。Ham's F-12培養(yǎng)基由Ham于1965年開發(fā),含有與DMEM類似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),但其配方略有不同。這種混合基質(zhì)結(jié)合了兩種培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn),提供了更全面的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以支持多種細(xì)胞系的生長(zhǎng)和增殖。
DMEM/F12培養(yǎng)基的主要成分包括糖類、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)、脂質(zhì)以及pH緩沖劑等。這些成分共同為細(xì)胞提供能量、碳源、蛋白質(zhì)合成所需的氨基酸、細(xì)胞代謝所需的維生素和礦物質(zhì)等。此外,DMEM/F12還含有緩沖劑(如碳酸氫鈉、HEPES),用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,維持細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
DMEM/F12培養(yǎng)基因其廣泛的適用性,常用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng),包括腫瘤細(xì)胞、原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞等。例如,它適用于293細(xì)胞系(一種常用的人類胚胎腎細(xì)胞系)、HeLa細(xì)胞系(一種源于人宮頸癌的細(xì)胞系)、MCF-7細(xì)胞系(一種人類乳腺癌細(xì)胞系)等多種細(xì)胞系的培養(yǎng)和繁殖。此外,DMEM/F12還適用于神經(jīng)元和心肌細(xì)胞等特定類型的細(xì)胞培養(yǎng)。
兩者之間的區(qū)別與選擇
雖然DMEM和DMEM/F12在基本功能和用途上相似,都為細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子,支持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,但它們?cè)诔煞趾瓦m用的細(xì)胞類型上存在一定的差異。
成分差異:DMEM主要含有氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽和葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成分,而DMEM/F12則結(jié)合了DMEM和Ham's F-12的優(yōu)點(diǎn),提供了更全面的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
適用細(xì)胞類型:DMEM適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),特別是根據(jù)葡萄糖含量的不同,適用于不同代謝速度和生長(zhǎng)特性的細(xì)胞。而DMEM/F12則因其全面的營(yíng)養(yǎng)成分,更適用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng),包括一些對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求較高的細(xì)胞類型。
在選擇使用哪種培養(yǎng)基時(shí),通常需要根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)決定。對(duì)于某些特定的細(xì)胞系或?qū)嶒?yàn)條件,可能需要進(jìn)一步調(diào)整培養(yǎng)基的配方或添加額外的生長(zhǎng)因子和激素等。
綜上所述,DMEM和DMEM/F12在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,但它們?cè)诔煞趾瓦m用的細(xì)胞類型上存在一定的差異。了解這些差異并根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的培養(yǎng)基,對(duì)于成功培養(yǎng)細(xì)胞和研究細(xì)胞生物學(xué)過程十分重要。
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