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高效液相色譜法可以檢測漆樹有效成分
我國的漆樹種植規模有多大？我來告訴你答案， 65萬畝種植面積，2億株以上。從漆樹上留下來的生漆是涂料生產的重要原料，素“有涂料王"的美譽。而漆樹葉的木、皮、枝、葉做成的漆樹提取物也是重要的中藥檢測種類之一。漆樹提取物中含有的顏木素、漆黃素和硫*素等多酚類化合物，具有抗氧化、抑菌、調節免疫、抗腫瘤、抗病毒、保護神經和防止神經衰老等生物活性。 此外漆樹中的有效成分還可以用于保健食品、化妝品和醫藥等行業，漆蠟也是重要的化工原料檢測種類之一。
一、漆樹行業分析
從上面我們也可以看出，漆樹屬于那種“混身都是寶"的經濟作物。雖然我國漆樹種植規模很大，但是漆樹的資源利用卻十分有限，產品應用單一，標準不完善，比如新發布的行業標準LY/T3280-2021《漆樹提取物》 甚至還處于尚未實施階段。相比國外，漆樹的藥用成分研究動力嚴重不足，難以形成高價值產業，不足以形成更加有力的經濟增長點，所以漆樹行業發展已經到了亟待改善的地步。通過漆樹有效成分分析，可以幫助我們在科研、 生產和開發應用以及外貿等領域促進漆樹資源的高價值化利用。
二、現有檢測方法介紹
目前，漆樹的飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚等成分的檢測方法主要有高效液相色譜（HPLC）、紅外（IR）、紫外光譜（UV spectrum）、核磁共振（NMR）、薄層層析（TLC）、氣相色譜-質譜（GC/MS）等檢測手段，漆黃素、黃顏木素、硫*素和紫鉚花素類化合物主要的分析檢測方法包括紫外分光光度法（UV spectrum、高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜/質譜法（HPLC-MS）和高效毛細管電泳法等，其中紫外分光光度法和高效液相色譜法最為常用。但是，目前并沒有關于漆樹中以上主要有效成分的、統一的、快速的檢測方法標準，這也使得行業中魚龍混雜，無法對行業發展形成良性刺激，從而極大的抑制了漆樹行業的發展，阻礙了這些有效成分的進一步應用。
三、試驗方法驗證
LY/T3280-2021《漆樹提取物》只提出了漆黃素、黃顏木素、硫*素的檢測分析方法。該標準中給出的方法是參考的國標GB/T 27579 《精油 高效液相色譜分析 通用法》，利用高效液相色譜-紫外檢測器和外標法進行定量分析。拜恩工程師團隊通過對該方法的檢測波長、 流動相系統、 流動相洗脫梯度、 進樣體積、 流速和柱溫等多方面因素進行考察，在參考了相關碩士、博士的論文和分析數據，經過驗證實驗并多次調整后，最終也建議采取高效液相色譜（HPLC）是檢測漆樹有效成分的最佳方法。
四、高效液相色譜法介紹
1.樣品制備注意事項
a.首先為了防止漆樹樣品中水分對結果的影響，并保證其結構不被破壞，提高提取效率，需要將漆樹樣品干燥處理即陰干，使得到的試樣含水率不大于 3%后，用粉碎機將其粉碎，密閉干燥保存。
b.鑒于不同漆樹樣品中不同有效成分含量的差別，在制定標準曲線的時候，漆酚標準溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00 μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、500.00 μg/mL 進行配置，黃酮標準溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、0.50 mg/mL、1.00 mg/mL、2.00 mg/mL 進行配置。該漆樹漆酚試樣溶液的制備方法我們是通過對其提取溶劑、料液比、浸泡時間、提取次數、萃取溶劑的考察及其正交試驗得到。
2.試驗步驟
精確稱取漆樹樣品 10 g（精確到 0.1 mg）于 500 mL 圓底燒瓶中，加 200 mL 醇常溫下浸泡 3 h，在 50℃下用旋蒸蒸發儀減壓回收溶劑，所得浸膏用 300mL 氯仿-水（體積比 3:1）溶液萃取 3 次，收集氯仿層，濃縮后，所得漆樹漆酚提取物樣品浸膏用甲醇溶解定容至 50 mL，經過 0.22 μm 濾膜過濾，濾液用于高效液相色譜儀測定.
總結：首先制備樣品測試溶液，然后利用高效液相色譜儀檢測，最后通過標準曲線得到樣品中各漆酚、黃酮的濃度，再將所得結果進行換算，得到最終漆樹樣品中飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚以及黃顏木素、漆黃素、紫鉚花素和硫*素的含量。
利用高效液相色譜法可以建立統一的快速、準確、高靈敏的漆樹中主要有效成分含量的測定方法，將使數據具有較強的可比性，成果將為漆樹中主要有效成分涉及的藥品、保健食品相關行業、檢測機構、管理機構的新產品研發、檢測和監管提供急需的提取分離檢測的工藝、技術方法、國家標準為提升漆樹廢棄物資源高值化利用和相關產品檢測水平提供技術支撐，促進林業資源提質增效。同時解決無高附加值新產品、相關企業、從業者尤其是農民種植戶的經濟水平低、經濟效益待提高等問題，對于可以改變人們對漆樹的傳統認識，與國際接軌，具有重要意義，并為漆樹在不同領域的應用，提供基礎。