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正確使用和保養二氧化碳培養箱對實驗結果至關重要
二氧化碳培養箱為細胞生長提供了理想的生長環境，培養箱本身性能的穩定和可靠性固然重要，另外，正確的使用方法和日常保養對實驗結果也是至關重要。
一、使用前
1、儀器應放置在平整的地面或者臺面上，環境應清潔整齊，干燥通風。
2、儀器使用前，各控制開關均應處于非工作狀態。
3、水套式二氧化碳培養箱未注水前不能打開電源開關，否則會損壞加熱元件，所加入的水必須是蒸餾水或無離子水，防止礦物質儲積在水箱內產生腐蝕作用，每年必須換一次水，經常檢查箱內水是否充足。
4、操作密碼設置需至少3人知道，以免遺忘密碼而無法開啟儀器。
5、確認所使用的CO2是純凈達標的，否則降低CO2傳感器的靈敏度和污染CO2過濾裝置。
6、不可將流入氣體壓力調至過大，減壓閥出氣壓力大不能超過0.1 Mpa，以免沖破管道。
7、二氧化碳培養箱正確安裝好后，向箱內蒸餾水槽中加入適量的無菌蒸餾水或無菌去離子水。
8、不適用于含有易揮發性化學溶劑，低濃度爆炸氣體和低著火點氣體的物品以及有毒物品的培養。
二、使用過程中
1、培養箱應由專人負責管理，操作盤上的任何開關和調節旋扭一旦固定后，不要隨意扭動，以免影響箱內溫度，CO2、濕度的波動，同時降低機器的靈敏度。
2、培養箱內細胞培養的放置需整潔有序，方便查找，同時應盡量提高培養箱的使用效率，負責人可視實驗情況啟用或停止空培養箱的使用，節約資源。
3、從培養箱取放物品前，用酒精清潔雙手（或手套）。
4、盡量縮短開門時間和減少開門次數，避免空氣污染。
5、 經常注意箱內蒸餾水槽中蒸餾水的量，定期（至少每兩周一次）更換水盤內的無菌蒸餾水或無菌去離子水，以保持箱內相對濕度，同時避免培養液蒸發；注意等高壓滅菌后的蒸餾水或去離子水冷卻后再倒入水槽。
6、當顯示溫度超過置定溫度1℃時，超溫報警指示燈亮并發出尖銳報警聲，這時應關閉電源30分鐘；若再打開電源(溫控)開關仍然超溫，則應關閉電源并報維修人員。
7、鋼瓶壓力低于0.2MPa時應更換鋼瓶。
8、箱內應定期用消毒液擦洗消毒，擱板可取出清洗消毒，防止其他微生物感染，導致實驗失敗。
三、使用后
1、如果二氧化碳培養箱長時間不用，關閉前必須清除工作室內水分，打開玻璃門通風24小時后再關閉。應將CO2開關關閉，防止CO2調節器失靈。
2、清潔二氧化碳培養箱工作室時，不要碰撞傳感器等部件。
3、搬運水套式培養箱前必須排除箱體內的水。
4、拆裝工作室內支架護罩，必須使用隨機扳手，不得過度用力。
5、搬運二氧化碳培養箱前應拿出工作室內的擱板和加濕盤，防止碰撞損壞玻璃門。
6、搬運培養箱時不能倒置，同時一定不要抬箱門，以免門變形。