在細胞培養中遇到培養液pH值變化太快,怎么辦
培養液pH值變化太快,怎么辦?
可能造成的原因:
1.CO2張力不對;
2.培養瓶蓋擰得太緊;
3.NaHCO3 緩沖系統緩沖力不足;
4.培養液中鹽濃度不正確;
5.細菌、酵母或真菌污染。
解決方法:
1.按培養液中NaHCO3濃度增加或減少培養箱內CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養液
2.松開瓶蓋1/4圈
3.加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度
4.在CO2培養環境中改用基于Hank’s鹽配制的培養液,在大氣培養環境中培養改用Hank’s鹽配制的培養液
5.丟棄培養物或用抗生素除菌