γδT細(xì)胞高效擴(kuò)增試劑盒*格產(chǎn)品簡(jiǎn)介
γδT細(xì)胞具有在體內(nèi)快速反應(yīng)的特性,在受到刺激時(shí),會(huì)先于αβ-T細(xì)胞釋放促炎性細(xì)胞因子(IFN-γ和TNF-α等)。 γδT細(xì)胞能夠激活NK細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞毒作用,與DC細(xì)胞互刺激成熟, APC細(xì)胞抗原呈遞的功能,激活αβ-T 細(xì)胞的免疫效應(yīng), γδT細(xì)胞的殺傷作用具有非MHC限制性,廣泛的殺瘤譜,已知對(duì)至少十幾種腫瘤細(xì)胞有殺傷作用。 γδT細(xì)胞在人外周血含量很少(1-5%),本產(chǎn)品能夠?qū)⑼庵苎械膯蝹€(gè)核細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增成γδT細(xì)胞,具有擴(kuò)增效率高,目的細(xì)胞百分比高的特點(diǎn),起始單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過(guò)14天培養(yǎng),總細(xì)胞數(shù)可以擴(kuò)增約50-100倍左右,γδT細(xì)胞數(shù)可以擴(kuò)增500-1000倍,其純度高于85%,并且全程無(wú)血清培養(yǎng),為基礎(chǔ)和臨床研究使用γδT細(xì)胞提供 一個(gè)有力的武器。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1 擴(kuò)增效率高:起始單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過(guò)14天培養(yǎng),總細(xì)胞可以擴(kuò)增約50-100倍左右,目的細(xì)胞(γδT細(xì)胞)數(shù)可以擴(kuò)增500-1000倍;
2 目的細(xì)胞百分比高: γδT細(xì)胞純度可以達(dá)到85%以上;
3 全程無(wú)血清培養(yǎng)。
γδT細(xì)胞高效擴(kuò)增試劑盒*格試劑盒成份
使用說(shuō)明
1 在血液采集前一天將100μL GD-I試劑加入4mL PBS,包被于T-75瓶,用錫紙包好,平放于4°C冰箱過(guò)夜;
注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。
2 D0 用PBS溶液洗滌前一天包被的T-75瓶一次,將制備好的單個(gè)核細(xì)胞(MNC)按0.5-1M/mL細(xì)胞密度鋪于洗滌后的T-75瓶中,加入GD-IV 47.5mL, GD-II 85μL,GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL;
注意:1)洗滌時(shí)用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶,輕微震蕩后倒出/吸出,切忌用沖力較大的移液器或移液槍反復(fù)沖洗以免破壞包被面;
2)本試劑盒所配試劑均為整支加入,可先用移液槍移取試劑管中試劑后再用培養(yǎng)基沖洗試劑管確保管內(nèi)剩余試劑能夠充分利用。
3)D3 補(bǔ)加90mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和10mL GD-III,轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)袋,此時(shí)袋子含150mL培養(yǎng)基;
4 )D5 往培養(yǎng)袋補(bǔ)加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III,此時(shí)袋子含300mL培養(yǎng)液;
5 )D7 往培養(yǎng)袋補(bǔ)加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III,此時(shí)袋子含600mL培養(yǎng)液;
6 )D9 每個(gè)培養(yǎng)袋補(bǔ)加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III,此時(shí)袋子含1100mL培養(yǎng)液;
注意: 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。
7 )D12-14 收獲γδT細(xì)胞。
培養(yǎng)效果
培養(yǎng)細(xì)胞14天后,細(xì)胞總數(shù)及目的細(xì)胞(γδ T cell)擴(kuò)增倍數(shù)以及流式表型分析(N=4)
產(chǎn)品保存
1 本產(chǎn)品需避光保存;
2 GD-I,GD-IV置于2-8°C保存,有效期為12個(gè)月,其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存,有效期為24個(gè)月;
3 請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超過(guò)保質(zhì)期,請(qǐng)勿使用;
4 為確保本產(chǎn)品的質(zhì)量,請(qǐng)避免對(duì)其反復(fù)凍融。