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人結腸黏膜上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 13:28:54瀏覽次數:230

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 結腸組織
人結腸黏膜上皮細胞的相關產品:K1(GLAG-66)人甲狀腺癌
細胞專用培養基細胞培養基500MLK562人慢性骨髓性白血病系細胞專用培養基細胞培養基125MLK562人慢性骨髓性白血病系細胞專用培養基細胞培養基500MLK562/ADR人K562耐阿霉株細胞專用培養基細胞培養基125MLK562/ADR人K562耐阿霉株細胞專用培養基細胞培養基500ML

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人結腸黏膜上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

結腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養方法,為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先機械分離法、后膠原消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

載脂蛋白A1抗體 附睪分泌蛋白4封閉多肽 人髓鞘相關糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒

腫瘤抑制基因P53蛋白抗體 鉀離子通道多聚體結構域蛋白8封閉多肽 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)試劑盒ELISA

缺氧誘導因子1α抑制蛋白/HIF1AN單克隆抗體 胱硫醚γ裂解封閉多肽 人髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA檢測試劑盒

CLEC2D蛋白抗體 巖藻糖轉移8封閉多肽 人髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒

英文名稱: ARP3 BCL7B蛋白封閉多肽 人髓過氧化物特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒ELISA

Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 精氨酰tRNA合成封閉多肽 人性鐵蛋白(AIF)檢測試劑盒elisa

核纖層蛋白A抗體 NLRP14蛋白封閉多肽 人性富亮氨核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA試劑盒

外胚層發育不良蛋白抗體 腫瘤壞死因子α轉換封閉多肽 人性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)試劑盒ELISA

英文名稱: phospho-ATF2 (Thr71) 磷化上皮鈣粘附分子封閉多肽 人四氫生物蝶呤(BH4)ELISA檢測試劑盒

HOXA10抗體 過氧化物體膜蛋白4封閉多肽 人四連接(CLEC3B)ELISA試劑盒

英文名稱: CD38 鞘磷脂沉積病C1樣蛋白1封閉多肽 人死亡相關蛋白1(DAP/DAP1)試劑盒ELISA

神經突觸前膜胞內蛋白13抗體 6號染色體開放閱讀框168封閉多肽 人絲蟲病抗體(IgG4)檢測試劑盒elisa

腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體 磷化胰島受體底物-1封閉多肽 人絲氨肽抑制劑,Kazal 1型(SPINK1)ELISA試劑盒

白介7抗體 富含脯氨蛋白25封閉多肽 人絲氨肽2甘露聚糖結合凝集(MASP2)試劑盒ELISA

水通道蛋白4抗體 麻疹病毒血凝封閉多肽 人絲氨HTRA1(HTRA1)ELISA檢測試劑盒

葡萄糖調節蛋白78/熱休克蛋白70蛋白5抗體 神經誘導胚胎發育相關蛋白Churchill封閉多肽 人絲氨/蘇氨激24(STK24)ELISA試劑盒

英文名稱: phospho-JAK2 (Tyr1007+Tyr1008) 轉導β1X連鎖蛋白封閉多肽 人絲氨/蘇氨蛋白激PAK4(PAK4)試劑盒ELISA

FAM55C蛋白抗體 白細胞介27封閉多肽 人絲氨/蘇氨蛋白激B-raf(BRAF)檢測試劑盒elisa
人結腸黏膜上皮細胞TJ905人腦膠質瘤細胞專用培養基英文名稱:TJ905細胞專用培養基500ML

TOV-112D人上皮性卵巢癌細胞專用培養基英文名稱:TOV-112D細胞專用培養基125ML

TOV-112D人上皮性卵巢癌細胞專用培養基英文名稱:TOV-112D細胞專用培養基500ML

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌株細胞專用培養基英文名稱:TPC-1細胞專用培養基125ML

TPC-1人乳頭狀甲狀腺癌株細胞專用培養基英文名稱:TPC-1細胞專用培養基500ML

TT人甲狀腺癌細胞專用培養基英文名稱:TT細胞專用培養基125ML

TT人甲狀腺癌細胞專用培養基英文名稱:TT細胞專用培養基500ML

 


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