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小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:00:55瀏覽次數(shù):295

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 直腸組織
小鼠直腸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

直腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過(guò)盆膈,下端以gang門(mén)而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細(xì)接gang管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無(wú)縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來(lái)自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈,來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動(dòng)中基本的運(yùn)動(dòng)方式;腸炎時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,這進(jìn)一步證明了炎癥時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng),可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對(duì)平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅指蛋白ZBTB3抗體 CD90封閉多肽 人雷帕霉靶蛋白(mTOR) ELISA檢測(cè)試劑盒

蛋白磷1調(diào)節(jié)亞基3C抗體 γ氨基丁運(yùn)載蛋白3封閉多肽 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA Kit

環(huán)指蛋白62抗體 鋅指蛋白124封閉多肽 人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒

腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體 軸突生長(zhǎng)誘向因子G1/神經(jīng)突起生長(zhǎng)導(dǎo)向因子G1封閉多肽 人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白550抗體 RAN結(jié)合蛋白17封閉多肽 人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17) ELISA檢測(cè)試劑盒

精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體 磷化紅細(xì)胞膜帶4.9蛋白封閉多肽 人空泡毒相關(guān)蛋白A(VacA)ELISA Kit

鋅指轉(zhuǎn)錄抑制因子KLF12抗體 SMAD8蛋白封閉多肽 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒

補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體 FLJ37543蛋白封閉多肽 人波形蛋白(VIM)試劑盒 ELISA

硫酯修飾因子1抗體 Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6封閉多肽 人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA檢測(cè)試劑盒

Patched/PTCH抗體 甲基化樣蛋白7A封閉多肽 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA Kit

自然殺傷細(xì)胞凝集樣受體3(Ly 49c)抗體 芳香基硫酯家族蛋白1封閉多肽 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒

G蛋白相關(guān)RABX5抗體 溶質(zhì)載體家族25成員17封閉多肽 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒 ELISA

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框94抗體 受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2封閉多肽 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA檢測(cè)試劑盒

S6核糖體蛋白單克隆抗體 嗅覺(jué)受體52E1封閉多肽 人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA Kit

二氫嘧啶相關(guān)蛋白5抗體 磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α封閉多肽 人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒

黑色瘤相關(guān)抗原11抗體 生長(zhǎng)抑受體4封閉多肽 人N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)試劑盒 ELISA

甲狀腺過(guò)氧化物抗體 巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6封閉多肽 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測(cè)試劑盒

感光視覺(jué)蛋白ECPN抗體 NAALADL2蛋白封閉多肽 人腦紅蛋白(NGB)ELISA Kit
小鼠直腸平滑肌細(xì)胞小鼠垂體細(xì)胞英文名稱:小鼠垂體細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠胸腺上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠胸腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠胸腺基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠胸腺基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠頜下腺上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠頜下腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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