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小鼠肌源性干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:40:24瀏覽次數(shù):245

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨骼肌組織
小鼠肌源性干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MA-104恒河猴腎細(xì)胞猴細(xì)胞系1×106Marc145非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞猴細(xì)胞系1×106RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞猴細(xì)胞系1×106VERO 非洲綠猴腎細(xì)胞猴細(xì)胞系1×106VERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞猴細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肌源性干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn);近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài),在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時(shí)才會(huì)激活;并且隨著年齡的增加,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對(duì)成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對(duì)細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對(duì)肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,從而保持干細(xì)胞表型。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白-胰dan白聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 轉(zhuǎn)錄因子E2F二聚體蛋白2封閉多肽 小鼠8異前列腺(8-iso-PG)ELISA試劑盒

活化蛋白激B抗體 磷化自噬相關(guān)蛋白3封閉多肽 小鼠γ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒ELISA

溶質(zhì)載體家族蛋白32成員A1抗體 RNF209/環(huán)指蛋白209封閉多肽 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA檢測(cè)試劑盒

骨保護(hù)蛋白配體/破骨細(xì)胞分化因子抗體 細(xì)胞球蛋白封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒

胰島瘤相關(guān)蛋白2抗體 甲基化組蛋白H3(tri methyl K4)封閉多肽 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒elisa

轉(zhuǎn)錄因子3抗體 葡萄糖6-磷脫氨1封閉多肽 小鼠髓過氧化物(MPO)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 氧固醇結(jié)合蛋白樣1A封閉多肽 小鼠顆粒B(Gzms-B)ELISA試劑盒

合成/谷氨氨連接抗體 α1微球蛋白封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒ELISA

FITC標(biāo)記人CD3單克隆抗體 短粗矮胖19蛋白樣1封閉多肽 小鼠顆粒A(Gzms-A)ELISA檢測(cè)試劑盒

RASL10B蛋白抗體 磷化核仁磷蛋白封閉多肽 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa試劑盒

腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體 白介6封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒elisa

甘油二酯激ι/DGK-ι抗體 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2封閉多肽 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)檢測(cè)試劑盒elisa

細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 G蛋白偶聯(lián)受體141封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒

磷化14-3-3 β/ζ抗體 重組人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1蛋白 小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒ELISA

英文名稱: WWOX 胞粘蛋白3封閉多肽 小鼠腎(Renin)ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞角蛋白5抗體 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子封閉多肽 小鼠α2抗纖溶(α2-AP)elisa試劑盒

神經(jīng)元抑制蛋白抗體 磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激封閉多肽 小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)試劑盒elisa

P53單克隆抗體 細(xì)胞色P450 11B1封閉多肽 小鼠泛蛋白(Ub)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠肌源性干細(xì)胞COLO320 DM人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COLO320 DM細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

COLO320 DM人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COLO320 DM細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COLO320 HSR細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COLO320 HSR細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COV434細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:COV434細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CW-2人結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CW-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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