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大鼠支氣管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 12:36:41瀏覽次數:222

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 支氣管組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠支氣管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

支氣管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能:①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態;②支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節機制是支氣管正常生理功能的基礎;③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質,發揮免疫調節功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

葡萄糖調節蛋白94抗體 DEPTOR蛋白封閉多肽 小鼠嗜粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

緊密連接蛋白1抗體 碳水化合物磺基轉移12封閉多肽 小鼠嗜粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒ELISA

5-羥色胺受體2B抗體 TOMM22蛋白封閉多肽 小鼠紅細胞生成(EPO)ELISA檢測試劑盒

乙酰化組蛋白H1b抗體 鈉碘轉運體蛋白8封閉多肽 小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)elisa試劑盒

人前列腺特異性抗原單克隆抗體 泌乳封閉多肽 小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒elisa

英文名稱: STAT6 異戊酰脫氫封閉多肽 小鼠Slit2檢測試劑盒elisa

磷化轉錄調節因子CEBP α 抗體 聚磷肌醇磷4B封閉多肽 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒

磷化雌激受體α抗體 G蛋白信號轉導調節因子18封閉多肽 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒ELISA

英文名稱: NQO1 微絲相關蛋白1封閉多肽 小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測試劑盒

脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 原鈣粘蛋白γA2封閉多肽 小鼠降鈣原(PCT)elisa試劑盒

鋅指蛋白ZBTB5抗體 核因子NFκB激活蛋白1封閉多肽 小鼠胰島自身抗體(IAA)試劑盒elisa

PSMα5單克隆抗體 磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白封閉多肽 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測試劑盒elisa

凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 叉頭蛋白H1封閉多肽 小鼠白介7(IL-7)ELISA試劑盒

英文名稱: MEKK3 NDUFB5蛋白封閉多肽 小鼠褪黑(MT)試劑盒ELISA

英文名稱: TNS4 溶質載體家族25成員2封閉多肽 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA檢測試劑盒

色氨羥化抗體 脫氫激1封閉多肽 小鼠熱休克因子1(HSF1)elisa試劑盒

干擾相關發育調節因子2抗體 3號染色體開放閱讀框19封閉多肽 小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒elisa

阻抑/腫瘤抑制因子抗體 G蛋白通路抑制蛋白1封閉多肽 小鼠白介2受體(IL-2R)檢測試劑盒elisa
大鼠支氣管平滑肌細胞Bel-7405人肝癌細胞專用培養基英文名稱:Bel-7405細胞專用培養基125ML

Bel-7405人肝癌細胞專用培養基英文名稱:Bel-7405細胞專用培養基500ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞專用培養基英文名稱:BEWO細胞專用培養基125ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞專用培養基英文名稱:BEWO細胞專用培養基500ML

BJ人皮膚成纖維細胞專用培養基英文名稱:BJ細胞專用培養基125ML

BJ人皮膚成纖維細胞專用培養基英文名稱:BJ細胞專用培養基500ML

BIU-87人膀胱癌細胞專用培養基英文名稱:BIU-87細胞專用培養基125ML

 


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