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大鼠臍靜脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 14:17:02瀏覽次數:259

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 臍帶組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠臍靜脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

臍帶組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細胞基礎;血管平滑肌細胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍靜脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

AF405標記的磷化表皮生長因子受體抗體 自然殺傷細胞親環相關蛋白封閉多肽 人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1) ELISA試劑盒

層粘連相關多肽蛋白1抗體 Rho家族GTP2封閉多肽 人腫瘤血管生長因子(TAF) 試劑盒 ELISA

G蛋白修補結構域蛋白8抗體 表皮生長因子受體封閉多肽 人細胞角蛋白20(CK-20) ELISA檢測試劑盒

CD73抗體 NOMO蛋白封閉多肽 人細胞角蛋白19(CK-19) ELISA Kit

突觸結合蛋白1樣1抗體 磷化自噬相關蛋白4B封閉多肽 人細胞角蛋白18(CK-18) ELISA試劑盒

胸腺基質淋巴細胞生成受體抗體 泛結合E2變異體1封閉多肽 人嗜鉻蛋白A(CgA) 試劑盒 ELISA

扭轉蛋白A抗體 智力發育調節相關蛋白BRWD3封閉多肽 人視網膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB) ELISA檢測試劑盒

瞬時受體電位通道1抗體 血管生成受體1封閉多肽 人生長調節致癌基因α/黑瘤生長刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA) ELISA Kit

程序性死亡配體2(CD273)單克隆抗體 絲氨/蘇氨蛋白激ICK封閉多肽 人成熟促進因子(MPF) ELISA試劑盒

組織相容性復合體蛋白1抗體 磷化β 連環蛋白封閉多肽 人去唾液糖蛋白受體(AGSPR)試劑盒 ELISA

粘蛋白19抗體 精子線粒體相關富含半胱氨蛋白封閉多肽 人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)ELISA檢測試劑盒

豬瘟病毒E2蛋白抗體 磷化細絲蛋白A封閉多肽 人金屬硫蛋白(MT)ELISA Kit

細胞分裂周期蛋白23抗體 撲克蒙蛋白封閉多肽 人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒

肌動蛋白結合蛋白Fascin抗體 磷化微管相關蛋白封閉多肽 人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)試劑盒 ELISA

G激錨定蛋白1抗體 Hemk甲基轉移家族2號蛋白封閉多肽 人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA檢測試劑盒

轉移生長因子β受體2抗體 后期促進復合蛋白3封閉多肽 人黑色瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA Kit

高遷移率族蛋白A2抗體 葡萄糖轉運蛋白3封閉多肽 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒

II型腎綜合征出血熱病毒(漢坦病毒 )抗體 信號肽復合物亞基3封閉多肽 人肝癌抗原(PHC)試劑盒 ELISA
大鼠臍靜脈平滑肌細胞人腸系膜動脈平滑肌細胞英文名稱:人腸系膜動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人結腸癌細胞英文名稱:人結腸癌細胞5×105不提供細胞鑒定報告

人腹膜間皮細胞英文名稱:人腹膜間皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人腹膜微血管內皮細胞英文名稱:人腹膜微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人結腸間質細胞英文名稱:人結腸間質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人結腸上皮細胞英文名稱:人結腸上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人腸微血管內皮細胞英文名稱:人腸微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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