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小鼠心臟微血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 15:22:49瀏覽次數:245

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 心臟組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠心臟微血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

心臟組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血- 再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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磷化蛋白激C α/β2抗體 一氧化氮合成-2(誘導型)封閉多肽 大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA檢測試劑盒

PHD-D4鋅指蛋白2抗體 胰腸同源結構域轉錄因子封閉多肽 大鼠高敏三碘甲狀腺原氨(u-T3)ELISA Kit

甘丙肽信息相關肽抗體 核糖核結合蛋白2封閉多肽 大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒

非霍奇金淋巴瘤重復蛋白3抗體 馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)封閉多肽 大鼠胱天9(Casp-9) 試劑盒 ELISA

LHX5蛋白抗體 組織相容性復合體α封閉多肽 大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA檢測試劑盒

轉錄因子HES-1抗體 重組小鼠FCGR1A/CD64蛋白 大鼠胱天3(Casp-3)ELISA Kit

LRWD1蛋白抗體 細胞凋亡誘導蛋白NALP3封閉多肽 大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒

整合相關蛋白CD47 血管緊張Ⅱ受體多肽 大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)試劑盒 ELISA
小鼠心臟微血管內皮細胞兔纖維環細胞英文名稱:兔纖維環細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔髓核細胞英文名稱:兔髓核細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔破骨細胞英文名稱:兔破骨細胞5×105提供化學染色報告

兔皮膚成纖維細胞英文名稱:兔皮膚成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔角質形成細胞英文名稱:兔角質形成細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔表皮干細胞英文名稱:兔表皮干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔前脂肪細胞英文名稱:兔前脂肪細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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