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人神經少突膠質細胞

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更新時間:2023-04-21 15:22:12瀏覽次數:224

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人神經少突膠質細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變,還會引起神經元損傷或精神類疾病,甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間;②神經細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的灰質區,常位于神經細胞周圍,與神經細胞的關系密切,故又稱為神經細胞周衛星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是為特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經發育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經少突膠質細胞經GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

S轉移M2抗體 瞬時受體電位蛋白12封閉多肽 大鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA檢測試劑盒

周期D2抗體 磷化細胞核因子p50/k基因結合核因子封閉多肽 大鼠透明質結合蛋白(HABP)ELISA Kit

促腎上腺皮質激釋放因子/促腎上皮質激釋放激抗體 CP2相關轉錄抑制因子1封閉多肽 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒

胃動受體抗體 ABI1/SSH3BP1蛋白封閉多肽 大鼠淋巴細胞因子試劑盒 ELISA

突觸融合蛋白1A抗體 戊型肝炎病毒封閉多肽 大鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒

四分子交聯體14抗體(四旋蛋白) 神經肽Y1受體封閉多肽 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA Kit

SHISA5蛋白抗體 EIF3S4蛋白封閉多肽 大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒

甘油二酯激δ/DGK-δ抗體 白細胞介1受體相關蛋白封閉多肽 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒 ELISA

C型凝集4家族E抗體 內質網膜蛋白UNC93B封閉多肽 大鼠Smad1  ELISA檢測試劑盒

耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白3抗體 組織相容性抗原H封閉多肽 大鼠Smad7  ELISA Kit

整合β7抗體 重組人雌激受體β蛋白 大鼠26S體(26S PSM) ELISA試劑盒

腦特異性同源POU結構域蛋白5抗體 血小板糖蛋白GPIb封閉多肽 大鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1) 試劑盒 ELISA

NUDT14蛋白抗體 辣椒受體5封閉多肽 大鼠內脂/內臟脂肪(visfatin)ELISA檢測試劑盒

艾滋病病毒抗體 SLAMF7封閉多肽 大鼠胰原激活肽(TAP)ELISA Kit

2號染色體開放閱讀框24抗體 APC標記豬胰島蛋白 大鼠補體因子H(CFH)ELISA試劑盒

Leishmanolysin樣肽抗體 AHA3(擬南芥)封閉多肽 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒 ELISA

英文名稱: Cytokeratin 16 牛血清白蛋白偶聯物 大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB) ELISA檢測試劑盒

線粒體核糖體蛋白L12抗體 前列腺跨膜上皮1抗原封閉多肽 大鼠胃(PP)ELISA Kit
人神經少突膠質細胞兔陰道真皮成纖維細胞英文名稱:兔陰道真皮成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔骨細胞英文名稱:兔骨細胞5×105提供化學染色報告

兔成骨細胞英文名稱:兔成骨細胞5×105提供化學染色報告

兔軟骨細胞英文名稱:兔軟骨細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔滑膜成纖維細胞英文名稱:兔滑膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔骨骼肌細胞英文名稱:兔骨骼肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔骨骼肌成纖維細胞英文名稱:兔骨骼肌成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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