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大鼠胰島β細胞

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更新時間:2023-04-21 16:04:00瀏覽次數:212

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胰腺組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠胰島β細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

胰腺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、胰dan白原、脂肪、淀粉等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑su,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細胞,即胰島B細胞,是胰島細胞的一種,屬內分泌細胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調節血糖的作用。胰島B細胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足(胰島素抵抗),會使血糖升高,從而引發糖尿病。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先用膠原消化分離得到胰島、再用胰逐級消化胰島制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Insulin含量檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

KIAA1486蛋白抗體 干擾調節因子3封閉多肽 

磷化激M2抗體 蛋氨亞砜還原B3封閉多肽 

糖蛋白gp330抗體 1號染色體開放閱讀框109封閉多肽 

皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體 纖維母細胞生長因子7封閉多肽 

轉導β樣蛋白1抗體 磷化血管生成受體2封閉多肽 

染色體相關蛋白CAP抗體 泛樣蛋白特異性2封閉多肽 

磷化p21激活激1/2/3抗體 CTP合成2封閉多肽 

巖藻糖轉移1抗體 跨膜蛋白180封閉多肽 

線粒體轉錄終止因子1抗體 KIAA0355蛋白封閉多肽 

NLRP11蛋白抗體 G蛋白家族RAB21蛋白封閉多肽 

補體C4BPA蛋白抗體 RAS癌基因相關蛋白Rab6C封閉多肽 

E3泛連接抗體 分泌載體膜蛋白2封閉多肽 

鉀離子通道四聚體結構域蛋白5抗體 IMPG2蛋白封閉多肽 

ATP結合盒轉運家族蛋白11抗體 HS6ST3蛋白封閉多肽 

磷化原癌基因Yes相關蛋白1抗體 DNAJC15封閉多肽 

鋅指蛋白530抗體 神經氨4封閉多肽 

糖尿病相關同源結構域蛋白SIX5抗體 磷化白細胞介-7受體a封閉多肽 

卷曲螺旋結構域蛋白16抗體 鉀離子通道蛋白5封閉多肽 
大鼠胰島β細胞10×多聚賴氨英文名稱:10×多聚賴氨10mL

明膠水溶液英文名稱:Gelatin100mL

膠原I英文名稱:膠原I100mg

膠原II英文名稱:膠原II100mg

膠原IV英文名稱:膠原IV100mg

細胞組織運輸保存液英文名稱:細胞組織運輸保存液500mL

小鼠重組 LIF 英文名稱:LIF MouseRecombinant10ug


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