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小鼠附睪上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 14:15:42瀏覽次數:244

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 附睪
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠附睪上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

附睪

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個由曲折、細小的管子構成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),一端接著睪丸(Testis)的曲細精管,具體結構主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養精子的功能,以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子,促進精子的進一步成熟。精子在附睪內獲得運動能力,總共停留8~17天,終達到功能上的成熟。在這個過程中,精子除了自身的因素,還受到附睪微環境的影響,這包括了一系列的物理、化學變化和精子形態的改變。可以說,附睪微環境正常穩定是附睪發揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發生異常,精子則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細胞、基細胞、亮細胞等幾種類型細胞。基細胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態沒有差別,一般認為是貯備細胞;另一種主細胞,是維持附睪生理功能的物質基礎,在各區段的主細胞形態結構差別很大,這也反映出各區段的生理功能的差異。除上皮細胞外,附睪的管壁組織結構也有規律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發地節律性收縮,而尾部平滑肌就沒有這種特點,僅在射精一瞬間出現強烈的節律收縮。作為負責提供適合精子成熟微環境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質和水分的轉運,對保持附睪內合適的離子濃度和酸堿度,為精子成熟提供適宜的環境起著相當重要的作用。睪丸的支持細胞每天能產生大量睪網液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網液,而從附睪排出的只不過幾百微升,也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內。動物實驗表明,結扎輸精管時睪丸不會腫脹,但若結扎睪丸輸出小管,睪丸第二天就會腫脹,這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養附睪上皮細胞對精子的發育、成熟,,附睪生理基礎功能研究具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

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實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

精子發生相關蛋白5樣蛋白1抗體 鋅指蛋白576封閉多肽 人細胞角蛋白17(CK17)ELISA檢測試劑盒

原鈣粘附蛋白α7抗體 溶質載體家族蛋白39成員A4封閉多肽 人制瘤M受體(OSMR)ELISA Kit

8號染色體開放閱讀框74抗體 受體蛋白酪氨磷F封閉多肽 人B細胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒

雄烷受體CAR抗體 重組乙型肝炎病毒E病毒樣顆粒蛋白 人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)試劑盒 ELISA

B淋巴細胞基因1抗體 線粒體rRNA甲基轉移1封閉多肽 人P27蛋白(P27)ELISA檢測試劑盒

白蛋白單克隆抗體 腺苷環化10封閉多肽 人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA Kit

異質核核糖核蛋白A/B抗體 分子伴侶CESK1蛋白封閉多肽 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒

甘氨受體β/GlyR β抗體 α胰重鏈H4封閉多肽 人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)試劑盒 ELISA

粘脂蛋白2抗體 ELMO3蛋白封閉多肽 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA檢測試劑盒

原癌基因蛋白c-kit(CD117)抗體 基爾曼氏細小病毒VP1/VP2,大鼠潛在病毒KRV封閉多肽 人粘蛋白/粘液5B(MUC5B)ELISA Kit

磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體 糜C封閉多肽 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒

蛋白酪氨磷PTPLA抗體 離子型谷氨受體4封閉多肽 人Dickkopf 1(DKK1)試劑盒 ELISA

PE-Cy5標記小鼠抗人CD8單克隆抗體 Wnt蛋白家族7B封閉多肽 人激肽釋放11(KLK 11) ELISA檢測試劑盒

精子頂端體蛋白10抗體 幾丁質3樣蛋白3封閉多肽 人生長調節致癌基因γ/黑瘤生長刺激因子(GROγ/CXCL3/MGSA) ELISA Kit

含氧轉移2A抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 人生長調節致癌基因β/黑瘤生長刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA) ELISA試劑盒

Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體 錨蛋白重復域28封閉多肽 人美麗線蟲凋亡基因(CED-3) 試劑盒 ELISA

果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2抗體 c-fos封閉多肽 人胸腺白血病抗原(TLa) ELISA檢測試劑盒

KIAA1161蛋白抗體 6號染色體開放閱讀框129封閉多肽 人腫瘤特異性移植抗原(TSTA) ELISA Kit
小鼠附睪上皮細胞人肝內膽管上皮細胞英文名稱:人肝內膽管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肝外膽管上皮細胞英文名稱:人肝外膽管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肝實質細胞英文名稱:人肝實質細胞5×105提供化學染色報告

人肝星狀細胞英文名稱:人肝星狀細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肝竇內皮細胞英文名稱:人肝竇內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人肝Kuffer細胞英文名稱:人肝Kuffer細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人直腸成纖維細胞英文名稱:人直腸成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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