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大鼠骨外膜細胞

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更新時間:2023-04-21 14:49:35瀏覽次數:203

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠骨外膜細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

骨組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞,稱為成骨細胞,這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞,稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細胞則像維修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構,并且還負責拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下,兩種細胞之間處于動態的平衡之中,完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后,成骨細胞首先啟動,從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復了骨的連續性,往往不符合生物力學的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體 鋅指蛋白75A封閉多肽 人妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測試劑盒

β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體 磷化核糖體S6激RSK2封閉多肽 人抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA Kit

尿抗體 葡萄糖轉運蛋白6封閉多肽 人抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒

環指蛋白160抗體 核糖核4封閉多肽 人妊娠皰疹抗體(HG)試劑盒 ELISA

單核細胞趨化誘導蛋白1抗體 膜相關環指蛋白10封閉多肽 人胎盤生長因子(PLGF)ELISA檢測試劑盒

SEC14樣蛋白2抗體 細胞色P450 4V2封閉多肽 小鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)ELISA Kit

磷化周期依賴激2抗體 精子頂體膜相關蛋白4封閉多肽 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒

離子型谷氨受體4抗體 SAMD14封閉多肽 小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 ELISA

分泌型磷脂A2抗體 6號染色體開放閱讀框封閉多肽 小鼠γ干擾(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒

糖蛋白C抗體 鋅指蛋白695封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit

DHX35蛋白抗體 重組腸道病毒71型/手足口病病毒3CD蛋白 小鼠白介13(IL-13)ELISA試劑盒

眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體 緊密連接蛋白20封閉多肽 小鼠白介18(IL-18)試劑盒 ELISA

11號染色體開放閱讀框74抗體 KIAA0247蛋白封閉多肽 人(TM)ELISA檢測試劑盒

G蛋白偶聯受體GPR113蛋白抗體 堿性鞘磷脂7封閉多肽 人Ⅶ(FⅦ) ELISA Kit

纖維鞘相互作用蛋白2抗體 磷化半胱氨9封閉多肽 人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒

錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體 高密度脂蛋白結合蛋白封閉多肽 人原(PT) 試劑盒 ELISA

原鈣粘蛋白γA12抗體 肝細胞生長因子激活蛋白/HGF activator封閉多肽 人補體因子D(CFD)ELISA檢測試劑盒

急性髓細胞白血病1蛋白1/2抗體 磷化周期B1封閉多肽 人血漿纖維連接蛋白(pFN) ELISA Kit
大鼠骨外膜細胞大鼠鞏膜成纖維細胞英文名稱:大鼠鞏膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網膜微血管周細胞英文名稱:大鼠視網膜微血管周細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠鼻腔粘膜上皮細胞英文名稱:大鼠鼻腔粘膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠眼外肌成纖維細胞英文名稱:大鼠眼外肌成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠眼微血管內皮細胞英文名稱:大鼠眼微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網膜神經節細胞英文名稱:大鼠視網膜神經節細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠視網膜小膠質細胞英文名稱:大鼠視網膜小膠質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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