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產品名稱 | 規格 | 貨號 |
1640(無糖)基礎培養基細胞 | 500ml | BJ-01X1990 |
產品名稱:1640(無糖)基礎培養基
英文名稱:1640(無糖)
貨號:BJ-01X1990
產品規格:500ml
產品特點:
1.本產品是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑,主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑,溶液的穩定性強,反應的靈敏度高。
2.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
3.無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
4.與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。
5.操作靈活,與MTT不同,平板讀數后可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成。
儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期半年。
使用方法:
1. 懸浮細胞,2000rpm離心5min收集細胞;對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短(過長細胞膜破碎,造成假陽性,過短,細胞黏連影響檢測)最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,吸除胰酶消化液,加入細胞培養液終止消化,2000rpm離心5min收集細胞。
2. 4℃預冷PBS,洗滌細胞2次(2000rpm x 5min),收集細胞2~5×105 。
3. 離心棄上清,加入500μL結合緩沖液,輕輕吹打重懸細胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,輕輕吹打混勻,加入5μL PI 輕輕吹打混勻,室溫避光孵育5-15min。(PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,時間允許,可以在檢測前5分鐘加入PI)
5. 流式細胞儀檢測或熒光顯微鏡觀察。最好在1h內檢測。
注意事項:
盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內推薦4℃保存,并適當注意避免反復凍融。
如果有細菌或真菌污染,會嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
如果細胞收集過程中使用了胰酶,需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導致染色失敗。
熒光物質均易發生淬滅,在進行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
用于流式細胞儀檢測時,如果發現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞,并且通過調整相關設置和參數也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。
需自備PBS。
本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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