詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品名稱:原代成纖維細胞無血清培養基
產品規格:100ml/500ml
貨號:BJ-01X1946
保存溫度(℃):2-8℃/-20℃
運輸溫度(℃):2-8℃/-20℃
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
豬囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)聯免疫吸附測定試劑盒靛紅溴化 GR鎘標準溶液100ug/mL,體: 1%硝
豬畸胎瘤衍生生長因子1(TDGF1)聯免疫吸附測定試劑盒靛紅溴化 光譜純SP鎘標準溶液0.100μg/g,體:K+ 2.2mg/L,Na+ 23mg/L,Ca2+ 39mg/L
豬對氧磷3(PON3)聯免疫吸附測定試劑盒 新橙皮苷溴化 99.95% metals basis,無水級,粉末鈷標準溶液 1000μg/ml
豬質金屬蛋白17(MMP-17)聯免疫吸附測定試劑盒新橙皮苷溴化 99.99% metals basis鈷標準溶液 500mg/L,溶劑:1%鹽
豬色素P450氧化還原(CPR)聯免疫吸附測定試劑盒 新橙皮苷溴化 FT-IR grade, ≥99.5%鈷標準溶液100?g/ml,體: 1%硝
豬生長分化因子9(GDF9)聯免疫吸附測定試劑盒S-8大孔吸附樹脂 溴化 99.997% metals basis銫標準溶液 1000μg/ml
豬前列腺性磷(ACP3/PAP)聯免疫吸附測定試劑盒頭孢哌 溴化 分析標準品,99.94%六價鉻標準溶液 六價鉻標準溶液 1000μg/ml
豬膽囊收縮素/腸促胰肽B受體(CCKBR)聯免疫吸附測定試劑盒 頭孢哌 氟化,無水 GR,粉末離子標準溶液1000μg/ml
豬角質轉谷氨酰(TGM1)聯免疫吸附測定試劑盒3,4-二羥氟化,無水 99.9% metals basis離子標準溶液500mg/L,溶劑:水
豬磷二酯4D(PDE4D)聯免疫吸附測定試劑盒3,4-二羥鉻 AR離子(Cl-)標準溶液 1000µg/mL,體:水
豬核孔蛋白107kda(NUP107)聯免疫吸附測定試劑盒3,4-二羥鉻 CP離子(Cl-)標準溶液 100µg/mL,體:水
豬肺表面活性物質相關蛋白C(SPC)聯免疫吸附測定試劑盒塞來西布鉻 GR鈰標準溶液 1000μg/ml
豬性唾液脯氨豐富蛋白2(PRB2)聯免疫吸附測定試劑盒 塞來西布鉻 PT鈰標準溶液 1000μg/ml,體:10%HNO3
豬腦環指蛋白(BFP)聯免疫吸附測定試劑盒塞來西布鉻 SP色度標準溶液 500度
豬谷氧還蛋白3(GLRX3)聯免疫吸附測定試劑盒塞來西布鉻 99.99% metals basis化學耗氧量(COD)-鉻法標準溶液 1000μg/ml
豬酰肽受體2(FPR2)聯免疫吸附測定試劑盒枯名鉻 ACS化物標準溶液 1.000 g/L in H2O
原代成纖維細胞無血清培養基鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體NADPH氧化1(NOX1)檢測試劑盒NOX1
有絲分裂蛋白BUB3抗體M型肌激(CKM)檢測試劑盒CKM
p60TRP蛋白抗體MAP激活化蛋白激2(MAPKAPK2)檢測試劑盒MAPKAPK2
博萊霉素水解抗體L選擇素(L-Selectin/CD62L)檢測試劑盒L-Selectin/CD62L
短蛋白聚糖抗體L-乳脫氫A鏈(LDH-A)檢測試劑盒LDH-A
BTB/POZ結構域蛋白3抗體L苯丙氨解氨(PAL)檢測試劑盒PAL
巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體Klotho(Klotho)檢測試劑盒Klotho
性亮氨拉鏈蛋白BZW1抗體KI-67抗原(MKI67)檢測試劑盒MKI67
骨形態發生蛋白受體1B抗體I型膠原蛋白(COL-1)檢測試劑盒COL-1