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大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:25:51瀏覽次數(shù):283

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基100mL原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系細(xì)胞培養(yǎng)基500mL

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

肉堿氧位甲基轉(zhuǎn)移抗體 磷化動(dòng)力蛋白1封閉多肽 

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 腦鈉通道蛋白1封閉多肽 

氣味結(jié)合蛋白2A抗體 嗅覺受體52E4封閉多肽 

11號(hào)染色體開放閱讀框71抗體 醛縮A封閉多肽 

脫氫13抗體 生長因子受體蛋白 

艾滋病病毒抗體 環(huán)指蛋白92封閉多肽 

14號(hào)染色體開放閱框35抗體 原鈣粘附蛋白8封閉多肽 

英文名稱: CD3D 19號(hào)染色體開放閱讀框55封閉多肽 

異質(zhì)核糖核蛋白F抗體 KIAA1841蛋白封閉多肽 

神經(jīng)激肽A抗體 蛋白激AKT1,2,3封閉多肽 

黑色瘤相關(guān)抗原D1單克隆抗體 JM4蛋白封閉多肽 

受體活性修飾蛋白1抗體 p53結(jié)合蛋白3封閉多肽 

白介33抗體 G蛋白偶聯(lián)受體109A封閉多肽 

COBL蛋白抗體 磷化活化復(fù)制因子2封閉多肽 

STPG4蛋白抗體 Ⅹ型膠原封閉多肽 

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體 HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白封閉多肽 

轉(zhuǎn)移生長因子β受體1單克隆抗體 過敏毒C4/補(bǔ)體C4封閉多肽 

RAD51D蛋白抗體 鋅指蛋白620封閉多肽 
大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞人皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人皮層神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人皮層神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人皮層神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖(不含酚紅)500mL-

SCC-25 [SCC 25; SCC25]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SCC-25 [SCC 25; SCC25]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SCC-25 [SCC 25; SCC25]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SCC-25 [SCC 25; SCC25]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SCC-25 [SCC 25; SCC25]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM/F12培養(yǎng)基(含HEPES),干粉5×1L-

EAC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4EAC細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持EAC細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含EAC細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于EAC細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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