詳細(xì)介紹
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Flos inulae |
貨號(hào) | BJ-P987968 |
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPV4 ELISA Kit包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPV5 ELISA Kit包裝1g
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRUB2 ELISA Kit包裝1g
凝血因子Ⅻ(F12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPV6 ELISA Kit包裝250mg
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶α3(GSTα3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPC4 ELISA Kit包裝5g
IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) ELISA Kit包裝1g
色酸羥化酶1(TPH1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TSFM ELISA Kit包裝5g
視黃結(jié)合蛋白1(RBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TSG101(Tumor susceptibility gene 101 protein) ELISA Kit包裝1g
G蛋白β1(GNβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TRPM6 ELISA Kit包裝5g
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅱ(TGFβR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TSGA10 ELISA Kit包裝5ml
死骨片1(SQSTM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PDE10A(cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 10A) ELISA Kit包裝100g
胃內(nèi)因子(GIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TSGA13 ELISA Kit包裝25g
旋覆花探針法PCR鑒定試劑盒說明書球形芽孢桿菌Human NCF1 (Neutrophil cytosol factor 1) ELISA KIT拉丁屬名: Bacillus sphaericus
地中海擬無枝酸菌Human MAP2(Microtubule-associated protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Amycolatopsis mediterranei
熱帶假絲酵母Human NPSR1 (Neuropeptide S receptor) ELISA KIT拉丁屬名: Candida tropicalis
出芽短梗霉Human NPFF (Pro-FMRFamide-related neuropeptide FF) ELISA KIT拉丁屬名: Aureobasidium pullulans
空腸彎曲桿菌Human GAP43(Neuromodulin) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
佛雷德里克斯堡假單胞菌Human NETO1 (Neuropilin and tolloid-like protein 1) ELISA KIT拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
Aurantimonas coralicidaHuman NLK (Serine/threonine-protein kinase NLK) ELISA KIT拉丁屬名: Aurantimonas coralicida
疏水戈登氏菌Human NSF (Vesicle-fusing ATPase) ELISA KIT拉丁屬名: Gordonia hydrophobica
熒光假單胞菌Human NRSN1 (Neurensin-1) ELISA KIT拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。