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小鼠膀胱移行上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:34:12瀏覽次數:248

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠膀胱移行上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

膀胱組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結構,位于骨盆內,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環形肌,形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過濾屏障內壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細胞和上皮細胞,進而影響腎臟病變。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

叉頭蛋白M1抗體 中心體蛋白1+2封閉多肽 

多效生長因子抗體 AAGAB蛋白封閉多肽 

蛋氨腺苷轉移抗體 EXOC6蛋白封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白抗體 BRPF3蛋白封閉多肽 

碳酐7抗體 角質蛋白β封閉多肽 

周期K抗體 神經突觸蛋白NGL3封閉多肽 

癌胚抗原相關細胞粘附分子3抗體 雪藻脂肪延長封閉多肽 

EBPL蛋白抗體 細胞角蛋白81封閉多肽 

英文名稱: EEF1A1 相關死亡促進因子Bad封閉多肽 

FNDC7蛋白抗體 細胞增殖誘導蛋白54封閉多肽 

嗜粒細胞趨化蛋白14抗體 生長/肥胖抑制活性多肽 

軟骨蛋白聚糖抗體 酪蛋白激1/casein kinase Iα封閉多肽 

水蛭抗體 磷化熱休克蛋白-70封閉多肽 

減數分裂內切EME2抗體 CD20樣蛋白2封閉多肽 

核結合蛋白NUCB1抗體 MATH5蛋白封閉多肽 

泛硫酯L1+3抗體 ZCCHC10蛋白封閉多肽 

淋巴結轉移的基因64蛋白抗體 細胞表面趨化因子受體3封閉多肽 

原鈣粘蛋白γB6抗體 表皮生長因子樣蛋白2封閉多肽  
小鼠膀胱移行上皮細胞小鼠胎盤間充質干細胞培養基100mL小鼠胎盤間充質干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠胎盤間充質干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠胎盤間充質干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠胎盤間充質干細胞的體外培養。

小鼠腮腺細胞培養基100mL小鼠腮腺細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠腮腺細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠腮腺細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腮腺細胞的體外培養。

MEM培養基(含NEAA、20%FBS)125mL×4MEM培養基(Minimum Essential Medium)也稱低必需培養基、小基本培養基或Eagle培養基,由Harry Eagle在Eagle基本培養基(BEM)的基礎上發展而來的,是一種基本、適用范圍廣的培養基,是動物細胞培養中常用的培養基之一。MEM培養基僅含有12種必需氨基、和8種維生,成分簡單,主要用于貼壁細胞的培養,配方修改后也可用于其他類型細胞培養。MEM含NEAA(非必須氨基)的培養基,是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨、L-谷氨、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨、L-脯氨、L-絲氨和甘氨7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基的副作用,有效促進細胞增殖代謝。

小鼠脾淋巴細胞培養基100mL小鼠脾淋巴細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠脾淋巴細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠脾淋巴細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脾淋巴細胞的體外培養。

COV434細胞專用培養基125mL×4COV434細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持COV434細胞佳的生長狀態。本產品中已包含COV434細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于COV434細胞的體外培養。

Hela S3細胞專用培養基125mL×4Hela S3細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持Hela S3細胞佳的生長狀態。本產品中已包含Hela S3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Hela S3細胞的體外培養。

RPMI-1640(不含L-)500mL-

 


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