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大鼠心臟微血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 14:13:29瀏覽次數:244

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 心臟組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠心臟微血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

心臟組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

肌球蛋白4抗體 溶體α-甘露糖苷封閉多肽 人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA檢測試劑盒

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LRSAM1蛋白抗體 EHM2蛋白封閉多肽 人白介1(IL-1)試劑盒 ELISA

細胞周期蛋白G相關激抗體 磷化細胞信號轉導分子SMAD7封閉多肽 人白介17(IL-17)ELISA檢測試劑盒

分泌載體膜蛋白5抗體 血管內皮生長因子C型封閉多肽 人白介1β (IL-1β)ELISA Kit

囊泡轉運蛋白SEC20 抗體 ADCK5蛋白封閉多肽 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒

磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗體 舞蹈癥相關蛋白KALRN封閉多肽 人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒 ELISA

電壓門控鉀通道亞基KV9.3抗體 肝糖原磷化封閉多肽 人巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA檢測試劑盒

鈉依賴性脯氨轉運PROT抗體 甲基丙二尿癥和高胱氨尿癥C型蛋白同源封閉多肽 人可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit

磷化心臟肌球蛋白輕鏈2抗體 磷甘油脫氫封閉多肽 人可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒

激活抗體 FAM55A蛋白封閉多肽 人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 ELISA

甲狀腺激受體相互作用11抗體 聚磷肌醇磷1封閉多肽 人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA檢測試劑盒

過氧化物體生物合成因子19抗體 同源轉錄因子DLX5封閉多肽 人結締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit

α1微球蛋白抗體 谷氨酰-tRNA合成蛋白1封閉多肽 人白介18(IL-18)ELISA試劑盒

核轉錄調節因子YY1抗體 線粒體核糖體蛋白L32封閉多肽 人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28) 試劑盒 ELISA

老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS1抗體 核蛋白NHN1封閉多肽 人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28) ELISA檢測試劑盒

腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 端粒保護蛋白1封閉多肽 人B細胞活化因子受體(BAFF-R) ELISA Kit
大鼠心臟微血管內皮細胞小鼠角膜基質細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠角膜基質細胞永生化細胞專用培養基100ML

小鼠角膜基質細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠角膜基質細胞永生化細胞專用培養基500ML

小鼠腸間質細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠腸間質細胞永生化細胞專用培養基100ML

小鼠腸間質細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:小鼠腸間質細胞永生化細胞專用培養基500ML

人支氣管平滑肌細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:人支氣管平滑肌細胞永生化細胞專用培養基100ML

人支氣管平滑肌細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:人支氣管平滑肌細胞永生化細胞專用培養基500ML

貓主動脈內皮細胞永生化細胞專用培養基英文名稱:貓主動脈內皮細胞永生化細胞專用培養基100ML
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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