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大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:04:11瀏覽次數(shù):275

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 眼球
大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:DAMI人巨核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLDAMI人巨核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLDAOY人髓母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLDAOY人髓母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLDAUDI人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自眼球虹膜組織;虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分,屬于眼球中層,位于血管膜的前部;在睫狀體前方虹膜,中心有一圓形開口,稱為瞳孔,猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈,內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí),虹膜會(huì)收蹜,只使一小束光線穿透瞳孔,進(jìn)入眼睛;當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中,虹膜就會(huì)往后退縮,使瞳孔變大,讓更多的光線進(jìn)入眼睛,多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞(IPE)是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,位于虹膜組織的后面,和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)同樣起源于神經(jīng)外胚葉層,可能具有相似的生物學(xué)功能,因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

眼球

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

氧化低密度脂蛋白抗體 補(bǔ)體C7封閉多肽 大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒

乙肝病毒衣殼蛋白抗體 6號(hào)染色體開放閱讀框106封閉多肽 大鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒ELISA

英文名稱: CD21 血管緊張?jiān)忾]多肽 大鼠生長(zhǎng)激(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒

核糖激RBKS抗體 Bax相互作用因子1封閉多肽 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)elisa試劑盒

足細(xì)胞特異蛋白抗體 三磷腺苷依賴解旋DDX23封閉多肽 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)試劑盒elisa

磷化非受體型酪氨蛋白激抗體 蛋白激C theta封閉多肽 大鼠FMS樣酪氨激3(Flt3)檢測(cè)試劑盒elisa

水通道蛋白-2抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146封閉多肽 大鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)ELISA試劑盒

磷化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 致癌基因封閉多肽 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)試劑盒ELISA

1號(hào)染色體開放閱讀框80抗體 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因GADD45β封閉多肽 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞表面趨化因子受體9抗體 硫軟骨多糖核心蛋白封閉多肽 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)elisa試劑盒

神經(jīng)細(xì)胞穿透2抗體 異染色質(zhì)蛋白1-γ/HP-1γ封閉多肽 大鼠性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)試劑盒elisa

G蛋白偶聯(lián)受體25抗體 腫瘤p63調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)檢測(cè)試劑盒elisa

英文名稱: PTGER2 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白16封閉多肽 大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒

英文名稱: ITGAE/CD103 高密度脂蛋白受體/清道夫受體封閉多肽 大鼠紅細(xì)胞生成(EPO)試劑盒ELISA

突觸足蛋白抗體 再生基因蛋白4封閉多肽 大鼠紅細(xì)胞生成受體(EPOR)ELISA檢測(cè)試劑盒

β淀粉樣肽1-40 C端/Aβ1-40 C端抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框49封閉多肽 大鼠嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)elisa試劑盒

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 可溶性蘋果脫氫封閉多肽 大鼠嗜粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒elisa

磷化波形蛋白抗體 T淋巴細(xì)胞膜蛋白3封閉多肽 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞MKN-45人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MKN-45細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MKN-45人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MKN-45細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MKN-74人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MKN-74細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MKN-74人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MKN-74細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MM.1R細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MM.1R細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MM.1S細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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