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大鼠食管上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:31:39瀏覽次數:230

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 食管組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠食管上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

食管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統發生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內,胸段通過膈孔與腹腔內腹相連,腹段很短與胃相連。在發育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變為復層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在食管與胃賁門交界處,復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋,其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障,防止食管內容物的滲入。特別的是,層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層;其中,僅基底層的細胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用鏈霉dan白 - 膠原聯合消化法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

人類乳頭狀瘤病毒16單克隆抗體 沉默驅動蛋白KIF4A封閉多肽 

神經細胞分化因子6抗體 前纖維蛋白1封閉多肽 

SMG5蛋白抗體 20號染色體開放閱讀框107封閉多肽 

FLJ21963蛋白抗體 煙堿型乙酰受體AChRα1封閉多肽 

突觸融合蛋白3抗體 細胞周期調控蛋白D1封閉多肽 

受精卵抑制蛋白1抗體 Wolfram綜合征蛋白1封閉多肽 

角蛋白相關蛋白KAP27.1抗體 苯丙氨羥化4封閉多肽 

血管生成受體2抗體 尾型同源盒轉錄因子4封閉多肽 

GalNAc-T4 抗體 21號染色體開放閱讀框24封閉多肽 

內皮受體A抗體 SAMD13蛋白封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激PIM3抗體 跨膜蛋白Orai2封閉多肽 

胱抑C單克隆抗體 層粘連相關多肽蛋白1封閉多肽 

細胞因子誘導蛋白29kDa抗體 NARFL蛋白封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 BAIAP2L2蛋白封閉多肽 

熱休克蛋白70蛋白4抗體 絲裂原活化蛋白激激2封閉多肽 

原癌基因CBL2抗體 腦特異性鈉依賴無機磷轉運蛋白封閉多肽 

白介-23抗體 INTS4L1蛋白封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激DCAMKL1單克隆抗體 磷化微管相關蛋白封閉多肽 
大鼠食管上皮細胞人心臟纖維原細胞培養基100mL人心臟纖維原細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人心臟纖維原細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人心臟纖維原細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人心臟纖維原細胞的體外培養。

293T [HEK-293T]細胞專用培養基125mL×4293T [HEK-293T]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持293T [HEK-293T]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含293T [HEK-293T]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293T [HEK-293T]細胞的體外培養。

小鼠呼吸道上皮細胞培養基100mL小鼠呼吸道上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠呼吸道上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠呼吸道上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠呼吸道上皮細胞的體外培養。

TTA1細胞專用培養基125mL×4TTA1細胞專用培養由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持TTA1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含TTA1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于TTA1細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

兔骨內膜間充質干細胞培養基100mL兔骨內膜間充質干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔骨內膜間充質干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔骨內膜間充質干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骨內膜間充質干細胞的體外培養。

M199培養基,干粉5×1L-

人膽管癌組織源細胞培養基100mL人膽管癌組織源細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人膽管癌組織源細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人膽管癌組織源細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人膽管癌組織源細胞的體外培養。

 


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