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大鼠膀胱成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:38:24瀏覽次數(shù):279

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 膀胱組織
大鼠膀胱成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMDA-MB-231+LUC人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMDA-MB-231+LUC人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,堿性成纖維細(xì)胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠膀胱成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

膀胱組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 卵母細(xì)胞透明帶糖蛋白2封閉多肽 人磷化糖原合成激3(pGSK-3)ELISA試劑盒

無精癥缺失基因1抗體 碘酪氨脫碘封閉多肽 人磷化肌球蛋白輕鏈(PMLC)試劑盒ELISA

嗅覺受體2A1抗體 鋅指蛋白114封閉多肽 人磷化蛋白激B(P-PKB)ELISA檢測(cè)試劑盒

膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1樣蛋白2抗體 KMO蛋白封閉多肽 人亮氨酰-半胱氨酰氨肽(LNPEP)ELISA試劑盒

少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 磷化胰島受體底物-1封閉多肽 人亮氨富含重復(fù)絲氨/蘇氨蛋白激2(LRRK2)試劑盒ELISA

HSPC111蛋白抗體 Lon2封閉多肽 人亮氨氨基肽3(LAP3)檢測(cè)試劑盒elisa

鈣激活鉀通道蛋白α1抗體 磷化原癌基因c-Met封閉多肽 人連蛋白(zonulin)ELISA試劑盒

溶質(zhì)載體家族蛋白7成員2抗體 白介-17B受體封閉多肽 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)試劑盒ELISA

磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 MFSD2B蛋白封閉多肽 人粒細(xì)胞集落刺激因子(CSF3)抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

MPRIP蛋白抗體 膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白XK封閉多肽 人利什曼原蟲(Leishmania)抗體(IgG)ELISA試劑盒

冠狀病毒表面S蛋白抗體 異檸檬脫氫3 beta亞基封閉多肽 人李斯特菌抗體(IgM)試劑盒ELISA

KBP蛋白抗體 磷肌醇相互作用蛋白封閉多肽 人李斯特菌抗體(IgG)檢測(cè)試劑盒elisa

G蛋白β3抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞基3抗體 磷化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2封閉多肽 人冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)ELISA試劑盒

干擾誘導(dǎo)蛋白P78抗體 突觸核膜蛋白3封閉多肽 人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 試劑盒ELISA

EIF4E2蛋白抗體 膜蛋白EVC2封閉多肽 人類似cDNA順序BC027382 ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化δ連環(huán)蛋白抗體 鋅指蛋白909封閉多肽 人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2 抗體 ELISA試劑盒

癌基因RAF1抗體 二肽基肽9封閉多肽 人類肌腱蛋白c(TNC)試劑盒ELISA

英文名稱: C1QA 3號(hào)染色體開放閱讀框59封閉多肽 人類肌腱蛋白(TN)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠膀胱成纖維細(xì)胞GC-2 SPd(ts)小鼠精母系細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GC-2 SPd(ts)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

GC-2 SPd(ts)小鼠精母系細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GC-2 SPd(ts)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

GL-261小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

GL-261小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

GL-261+luc小鼠膠質(zhì)瘤熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261+luc細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

GL-261+luc小鼠膠質(zhì)瘤熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GL-261+luc細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

GT1-1小鼠垂體瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:GT1-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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