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人視網膜Muller細胞

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更新時間:2023-04-21 14:39:20瀏覽次數:260

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 視網膜組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人視網膜Muller細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

視網膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力強。視網膜Muller細胞作為視網膜中的主要膠質細胞,大約占視網膜膠質細胞的90%,因而在視網膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上,Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發達的內質網,細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態也會有所差異的。視網膜Muller細胞是一種特化的神經膠質細胞,不僅具有維持視網膜的正常結構和功能的作用,并調制視網膜神經元活動,還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網膜病變、增生性糖尿病視網膜病變等,體外培養Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法和胰dan白反復消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

腫瘤壞死因子受體相關蛋白6結合蛋白抗體 細胞角蛋白6C封閉多肽 人超氧化物歧化(SOD)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Annexin V 腦衰蛋白反應調節蛋白4封閉多肽 人二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)ELISA Kit

鈣粘蛋白15抗體 JMJD4蛋白封閉多肽 人組織蛋白去乙酰化(HD)ELISA試劑盒

G蛋白偶聯受體GPR161蛋白抗體 神經元特異性烯醇化/γ 烯醇化封閉多肽 人甲基化(Methylase)試劑盒 ELISA

ras基因相關蛋白RAB7樣蛋白1抗體 GAGE12H蛋白封閉多肽 人抗酒石性磷5b(TRACP-5b)ELISA檢測試劑盒

CD36抗體 6號染色體開放閱讀框70封閉多肽 人磷肌醇3激(PI3K)ELISA Kit

ILDR2蛋白抗體 精子細胞堿性蛋白1樣蛋白封閉多肽 人蛋白激B(PKB)ELISA試劑盒

血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 免疫相關GTPase家族M蛋白1封閉多肽 人血紅氧合2(HO-2)試劑盒 ELISA

二氫葉還原抗體 G蛋白偶合受體激2封閉多肽 人激M2型同工(M2-PK)ELISA檢測試劑盒

NDUFB10蛋白抗體 腫瘤/睪丸抗原50封閉多肽 人甲狀腺過氧化物(TPO)ELISA Kit

PEST含核蛋白抗體 KLHDC3蛋白封閉多肽 人αL巖藻糖苷(AFU)ELISA試劑盒

低密度脂蛋白受體相關蛋白11抗體 4型冰結構蛋白LS-12-like (Danio rerio) 蛋白封閉多肽 人內皮型一氧化氮合成(eNOS)試劑盒 ELISA

甲狀腺過氧化物抗體 巖藻糖1磷鳥苷酰轉移封閉多肽 人血紅氧合1(HO-1)ELISA檢測試劑盒

突觸足蛋白2抗體 纖維蛋白溶原封閉多肽 人誘導型一氧化氮合成(iNOS)ELISA Kit

CD39樣蛋白2/ENTPD6抗體 G蛋白結合蛋白7封閉多肽 人磷脂A2(PL-A2)ELISA試劑盒

細胞角蛋白77抗體 跨膜蛋白87A封閉多肽 人一氧化氮合成(NOS)試劑盒 ELISA

高密度脂蛋白結合蛋白抗體 突觸足蛋白封閉多肽 人端粒(TE)ELISA檢測試劑盒

轉錄因子蛋白SIM1抗體 磷化多巴胺/cAMP調節磷蛋白封閉多肽 人基質金屬5(MMP-5)ELISA Kit
人視網膜Muller細胞大鼠卵巢內膜細胞英文名稱:大鼠卵巢內膜細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠子宮內膜間質細胞英文名稱:大鼠子宮內膜間質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠睪丸間質細胞英文名稱:大鼠睪丸間質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠子宮成纖維細胞英文名稱:大鼠子宮成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠子宮內膜基質細胞英文名稱:大鼠子宮內膜基質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠卵泡膜細胞英文名稱:大鼠卵泡膜細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠海綿體內皮細胞英文名稱:大鼠海綿體內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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