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人腦微血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-23 09:57:05瀏覽次數:259

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
人腦微血管內皮細胞的相關產品:T/G HA-VSMC (人血管平滑肌細胞)1×10?cells/T25培養瓶SW872 (人脂肪肉瘤細胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶SK-MES-1 (人肺鱗癌細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養瓶MPC-11 (小鼠漿細胞瘤)1×10?cells/T25培養瓶SW 780 [SW-780, SW780]

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦組織;腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同,大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子,調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性,內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下:①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產生很高的跨內皮阻抗,延遲細胞旁的通量;②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構,其液相物質胞飲水平較低;③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位和載體介導轉運系統,從而產生“兩極分化"的表現型。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人腦微血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化TRAF2和NCK激相互作用蛋白抗體 生肌決定因子Myf5封閉多肽 

微管蛋白β輔助因子D抗體 磷化過氧化活化增生受體γ封閉多肽 

蝮蛇蛇毒蛋白抗體 核纖層蛋白B(細胞核膜標志物)封閉多肽 

甘丙肽受體3抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 

氧化應激反應蛋白1抗體 凋亡加強結構域蛋白12封閉多肽 

原鈣粘附蛋白17抗體 肥大細胞類胰封閉多肽 

ETS結構域轉錄因子FEV抗體 驅動蛋白家族成員26B封閉多肽 

選擇性剪接因子3亞基1抗體 7跨膜蛋白超家族成員1封閉多肽 

多配體聚糖4抗體 富含亮氨重復序列跨膜結構域2封閉多肽 

TBC結構域TBCD4蛋白抗體 轉錄因子SOX10封閉多肽 

eIF5A2蛋白抗體 增生肉蛋白1封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白L20抗體 鋅轉運蛋白1封閉多肽 

肌球蛋白13抗體 絲氨/蘇氨蛋白磷1調節亞基10封閉多肽 

丙型肝炎病毒NS5A/Hepatitis C Virus NS5抗體 抑瘤M受體封閉多肽 

氨基丁轉運蛋白VGAT抗體 緊密連接蛋白4封閉多肽 

促黑細胞激γ抗體 重組人α-中連蛋白 

麻瘋病和帕金森氏病共同調節蛋白抗體 磷化HER2受體封閉多肽 

MPV17L2蛋白抗體 6號染色體開放閱讀框211封閉多肽 
人腦微血管內皮細胞CCRF-CEM [CCRF CEM]細胞專用培養基125mL×4CCRF-CEM [CCRF CEM]細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持CCRF-CEM [CCRF CEM]細胞佳的生長狀態。本產品中已包含CCRF-CEM [CCRF CEM]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CCRF-CEM [CCRF CEM]細胞的體外培養。

SRSV/3T3細胞專用培養基125mL×4SRSV/3T3細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SRSV/3T3細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SRSV/3T3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SRSV/3T3細胞的體外培養。

小鼠腸動脈內皮細胞培養基100mL小鼠腸動脈內皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠腸動脈內皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠腸動脈內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腸動脈內皮細胞的體外培養。

U-118 MG細胞專用培養基125mL×4U-118 MG細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持U-118 MG細胞佳的生長狀態。本產品中已包含U-118 MG細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于U-118 MG細胞的體外培養。

大鼠肺成纖維細胞培養基100mL大鼠肺成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠肺成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠肺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺成纖維細胞的體外培養。

小鼠腦微血管周細胞培養基100mL小鼠腦微血管周細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠腦微血管周細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠腦微血管周細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腦微血管周細胞的體外培養。

MH-S細胞專用培養基125mL×4MH-S細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持MH-S細胞佳的生長狀態。本產品中已包含MH-S細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MH-S細胞的體外培養。
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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