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人胃癌組織源成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 08:52:25瀏覽次數(shù):276

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胃癌組織
人胃癌組織源成纖維細胞的相關(guān)產(chǎn)品:豬腎小管上皮細胞原代細胞5×105豬腎小球系膜細胞原代細胞5×105豬膀胱上皮細胞原代細胞5×105豬膀胱平滑肌細胞原代細胞5×105豬前列腺成纖維細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胃癌組織;胃癌(gastric carcinoma)是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤,在我國各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,胃癌發(fā)病有明顯的地域性差別,在我國的西北與東部沿海地區(qū)胃癌發(fā)病率比南方地區(qū)明顯為高。好發(fā)年齡在50歲以上,男女發(fā)病率之比為2:1。由于飲食結(jié)構(gòu)的改變、工作壓力增大以及幽門螺桿菌的感染等原因,使得胃癌呈現(xiàn)年輕化傾向。胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部,胃大彎、胃小彎及前后壁均可受累。絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌,早期無明顯癥狀,或出現(xiàn)上腹不適、噯氣等非特異性癥狀,常與胃炎、胃潰瘍等胃慢性疾病癥狀相似,易被忽略,因此,目前我國胃癌的早期診斷率仍較低。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人胃癌組織源成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

胃癌組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

4型冰結(jié)構(gòu)蛋白LS-12-like (Danio rerio) 蛋白抗體 半乳糖凝集9C封閉多肽 

白細胞介29抗體 磷化細胞核因子封閉多肽 

FLJ46536蛋白抗體 新朊蛋白封閉多肽 

蛋白激C亞性D型抗體 鋅指蛋白394封閉多肽 

驅(qū)動蛋白家族成員19抗體 整合αX封閉多肽 

英文名稱: RhoA 人絨毛膜促性腺激(β HCG)/HCGB天然蛋白 

白介-22抗體 脂肪酰胺水解1封閉多肽 

神經(jīng)視錐蛋白樣1(神經(jīng)鈣蛋白)抗體 FAM101A蛋白封閉多肽 

維甲誘導(dǎo)蛋白6抗體 多巴胺受體相互作用蛋白5封閉多肽 

金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體 KIAA0748蛋白封閉多肽 

傷核糖核H抗體 嗜粒細胞趨化蛋白3封閉多肽 

效應(yīng)細胞受體1抗體 重組犬干擾α蛋白 

6號染色體開放閱讀框62抗體 磷化癌基因FOS蛋白B封閉多肽 

長鏈脂肪延長ELOVL4抗體 絲氨23封閉多肽 

磷烯醇羧激抗體 SAMD8蛋白封閉多肽 

微粒體S轉(zhuǎn)移1抗體 鋅指蛋白189封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 核仁蛋白14封閉多肽 

細胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白FP1抗體 干擾β封閉多肽 
人胃癌組織源成纖維細胞NK-92細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NK-92細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NK-92細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NK-92細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NK-92細胞的體外培養(yǎng)。

人小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基100mL人小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人小梁網(wǎng)細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人小梁網(wǎng)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人小梁網(wǎng)細胞的體外培養(yǎng)。

人滑膜成纖維細胞(骨性關(guān)節(jié)炎)培養(yǎng)基100mL人滑膜成纖維細胞(骨性關(guān)節(jié)炎)培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人滑膜成纖維細胞(骨性關(guān)節(jié)炎)佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人滑膜成纖維細胞(骨性關(guān)節(jié)炎)生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人滑膜成纖維細胞(骨性關(guān)節(jié)炎)的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

人輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基100mL人輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人輸尿管上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人輸尿管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人輸尿管上皮細胞的體外培養(yǎng)。

WB-F344細胞專用培養(yǎng)基125mL×4WB-F344細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持WB-F344細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含WB-F344細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于WB-F344細胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H520細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H520細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NCI-H520細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H520細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H520細胞的體外培養(yǎng)。

MEM(含HEPES)500mL-
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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