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人淋巴管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 15:53:41瀏覽次數:257

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 淋巴管
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人淋巴管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

淋巴管

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發達,外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經過一個或多個淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮,是構成淋巴管壁的主要結構,參與維持體液平衡,調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能:①調節體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結核。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用中性dan白消化法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  內皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

水通道蛋白5抗體 α-甘露糖苷2x封閉多肽 

螺旋環螺旋蛋白2抗體 凋亡抑制因子5封閉多肽 

英文名稱: Bad CD44封閉多肽 

細胞色P450 A7抗體 雌激受體α封閉多肽 

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N-甲基轉移抗體 微粒體S轉移1封閉多肽 

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尿皮質UCN3抗體 MAB21L1蛋白封閉多肽 

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神經降壓抗體 微小染色體維持缺陷蛋白4封閉多肽 

肌動蛋白相關蛋白2/3抗體 20號染色體開放閱讀框117封閉多肽 
人淋巴管內皮細胞原代精原細胞培養體系英文名稱:原代精原細胞培養體系500mL

原代內膜細胞培養體系英文名稱:原代內膜細胞培養體系100mL

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