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大鼠外周血單個核細胞

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更新時間:2023-04-21 14:37:40瀏覽次數:248

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠外周血單個核細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

外周血

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

RAS互動/干擾蛋白1抗體 BEND2蛋白封閉多肽 人鳥氨脫羧(ODC)ELISA試劑盒

ELAVL4蛋白抗體 擴張型心肌病蛋白1G封閉多肽 人蛋白酪氨激(PTK/CD115)試劑盒 ELISA

生肌調節因子6抗體 磷脂酰肌醇特異性磷脂結構域C X封閉多肽 人蛋白酪氨磷(PTP/PTPase/CD148)ELISA檢測試劑盒

胰腺特異轉錄因子PTF1A抗體 蛙皮受體3封閉多肽 人腫瘤壞死因子α轉化(TACE)ELISA Kit

溶血磷脂酰酰基轉移2抗體 跨膜蛋白BRI封閉多肽 人多形核白細胞彈性(PMN Elastase)ELISA試劑盒

1號染色體開放閱讀框190抗體 鋅指蛋白BED4封閉多肽 人型纖溶原激活物(uPA/PLAU)試劑盒 ELISA

卷曲螺旋結構域蛋白104抗體 6號染色體開放閱讀框173封閉多肽 人激肽釋放8(KLK 8) ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白741抗體 突觸糖蛋白2封閉多肽 人激肽釋放6(KLK 6) ELISA Kit

Nogo受體反應蛋白抗體 硫氧還蛋白封閉多肽 人果糖1,6二磷醛縮(FDA)ELISA試劑盒

多聚腺苷結合蛋白相互作用蛋白1抗體 SPOP蛋白封閉多肽 人組織D(cath-D) 試劑盒 ELISA

己醛醣鹽水解酵抗體 磷化HER2受體封閉多肽 人激敏感性脂肪(HSL) ELISA檢測試劑盒

磷化谷氨受體2B抗體 溶質載體家族25成員18封閉多肽 人胰激肽原(PK) ELISA Kit

毒蕈堿型乙酰受體M5抗體 著絲粒蛋白Q封閉多肽 人烏頭2(ACO-2) ELISA試劑盒

KMT5A單克隆抗體 重組人肌激同工CKMB蛋白 人26S體(26S PSM) 試劑盒 ELISA

高遷移率族蛋白2樣蛋白1抗體 T細胞表面糖蛋白CD1C封閉多肽 人周期依賴性激4(CDK-4) ELISA檢測試劑盒

T淋巴細胞膜蛋白4抗體 甘油二酯激γ/DGK-γ封閉多肽 人胎盤堿性磷(PLAP) ELISA Kit

利鈉肽受體C單克隆抗體 FLIP封閉多肽 人胎盤堿性磷(PLAP) ELISA試劑盒

銅代謝結構域蛋白9抗體 線粒體絲氨封閉多肽 人受體酪氨激(RTKs) 試劑盒 ELISA
大鼠外周血單個核細胞大鼠胸腺上皮細胞英文名稱:大鼠胸腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠胸腺基質細胞英文名稱:大鼠胸腺基質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠頜下腺上皮細胞英文名稱:大鼠頜下腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠腎上腺皮質細胞英文名稱:大鼠腎上腺皮質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠腎上腺髓質細胞英文名稱:大鼠腎上腺髓質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠胰腺導管上皮細胞英文名稱:大鼠胰腺導管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠胰腺腺泡上皮細胞英文名稱:大鼠胰腺腺泡上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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