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兔骺軟骨細胞

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更新時間:2023-04-21 12:57:48瀏覽次數:266

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 生長板組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

兔骺軟骨細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

生長板組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大,終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內,這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,骺軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原 - 中性dan白聯合消化并軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

微管相關蛋白1A抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 大鼠血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒

增生肉蛋白1抗體 細胞色CYP3A1封閉多肽 大鼠骨膠原交聯(Cr)試劑盒ELISA

磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體 磷化DNA甲基轉移-3α封閉多肽 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA檢測試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白46抗體 著絲粒蛋白S封閉多肽 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒

脫中胚蛋白抗體 橋粒糖蛋白4封閉多肽 大鼠吡啶交聯物(PY)試劑盒elisa

血管內皮生長因子抗體 B細胞遷移基因2封閉多肽 大鼠骨橋(OPN)檢測試劑盒elisa

磷化孕激受體抗體 Toll樣受體1封閉多肽 大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)ELISA試劑盒

跨膜受體蛋白Notch-3抗體 腺病毒早期E1A蛋白封閉多肽 大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒ELISA

英文名稱: Cyclophilin B(Loading Control) 前列腺E受體蛋白4封閉多肽 大鼠半胱氨抑制劑/胱抑C(Cys-C)ELISA檢測試劑盒

泛蛋白連接D2抗體 鈣粘蛋白28封閉多肽 大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)elisa試劑盒

絲裂原活化蛋白激磷-2抗體 原鈣粘附蛋白11X封閉多肽 大鼠激M2型同工(M2-PK)試劑盒elisa

9號染色體開放閱讀框72抗體 G蛋白偶聯受體TGR7蛋白封閉多肽 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)檢測試劑盒elisa

PRPF4蛋白抗體 細胞核轉錄因子X盒結合蛋白封閉多肽 大鼠γ氨基丁(GABA)ELISA試劑盒

遺傳性血色病蛋白相關蛋白1抗體 膜粘連蛋白11封閉多肽 大鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒ELISA

堿性成纖維細胞生長因子抗體 生長抑多肽 大鼠P物質受體(SP-R)ELISA檢測試劑盒

基質金屬-7抗體 豬藍耳病病毒GP5蛋白封閉多肽 大鼠P物質(SP)elisa試劑盒

驅動蛋白家族蛋白13B抗體 EAT2蛋白封閉多肽 大鼠αL巖藻糖苷(AFU)試劑盒elisa

淋巴細胞抗原6G抗體 鋅指蛋白144封閉多肽 大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)檢測試劑盒elisa
兔骺軟骨細胞KGN人卵巢顆粒瘤細胞專用培養基英文名稱:KGN細胞專用培養基125ML

KGN人卵巢顆粒瘤細胞專用培養基英文名稱:KGN細胞專用培養基500ML

KLE人子宮內膜癌細胞專用培養基英文名稱:KLE細胞專用培養基125ML

KLE人子宮內膜癌細胞專用培養基英文名稱:KLE細胞專用培養基500ML

KNS-89人腦膠質瘤細胞專用培養基英文名稱:KNS-89細胞專用培養基125ML

KNS-89人腦膠質瘤細胞專用培養基英文名稱:KNS-89細胞專用培養基500ML

KTC-1人甲狀腺癌細胞專用培養基英文名稱:KTC-1細胞專用培養基125ML

 


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